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羟脯氨酸测定试剂盒(碱水解法)(测动物血清、组织、尿液)说明

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  • 上海研生
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  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Hydroxyproline assay kit

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      50管/48样

    【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称:羟脯氨酸测定试剂盒(碱水解法)(测动物血清、组织、尿液)说明书
    英文名称:Hydroxyproline assay kit
    产品规格:50管/48样
    发货周期:1~3天
    发货周期:1~3天

    检测指标:羟脯氨酸;Hyp
    本试剂盒可测动物血清(浆)、组织及培养细胞、培养液、体液等样本中羟脯氨酸含量。羟脯氨酸在胶原蛋白中占13.4%,在弹性蛋白中占极少量,其它蛋白中均不存在。而胶原蛋白大多分布在皮肤、腱、软骨、血管等处,因此羟脯氨酸的量能 反映结缔组织疾病的胶原代谢情况。
    有人把皮肤中羟脯氨酸的测定作为筛选抗衰老药物的一个指标。在发育阶段随年龄的增长,其羟脯氨酸在尿中排泄增加,而发育 停止后稳定。老年人的羟脯氨酸比年轻人要少。鼠患有自发性高血压及继发性高血压时,尿中羟脯氨酸含量增加。手术创伤会导致尿羟脯氨酸排泄量的增加,因高 脂、低蛋白、酒精中毒及毒物、营养不良,或肝细胞变性坏死,通过炎症使纤维增加,分割肝小叶,导致肝硬化。肝纤维化时,肝内主要增加的成分为胶原纤维,羟 脯氨酸为胶原纤维所特有,测定肝羟脯氨酸的含量,可换算成肝胶原蛋白的含量,以反映肝纤维化程度。胶原纤维分解主要依赖胶原酶和其它蛋白酶的作用,其分解 产物羟脯氨酸从尿中排出,测定尿羟脯氨酸的含量,可反应胶原降解的情况。通过测定组织及尿中羟脯氨酸的含量,一方面可以判断纤维化程度,同时可以筛选预防 与治疗的药物。
    产品优点如下:
    1、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
    5、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、尿液以及各种水产等,效果均佳。
    2、再现性好:变异系数CV=2.1%。
    3、回收试验: X =102%。
    4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
    5、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、尿液以及各种水产等,效果均佳。
    【培养指南】
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    Bonamia spp.包纳米虫属通用探针法荧光定量PCR试剂盒AGPAT4RiboRuler™ High Range RNA Ladder, ready-to-use5x40 µl小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫试剂盒

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    Bordetella avium禽波氏杆菌 PCR试剂盒VEGF英文名称SLC34A2FRA2/FOSL2抗体
    Rhodanine规格:>98%,IndGradeBR,98%98%100gCTRCurculigosideAnti-OAS1寡腺苷酸合成酶-1Anti-OAS1寡腺苷酸合成酶-148T/96TVEGFR1英文名称SORBS2叉头蛋白P3抗体
    BR,98%粒度:2-20μm25gCRLRAbrineAnti-OAT-1/SLC22A6阴离子转运蛋白-1抗体Anti-OAT-1/SLC22A6阴离子转运蛋白-1抗体48T/96TVEGFR2英文名称Sialoadhesin成纤维细胞生长因子8抗体
    BR,98%粒度:2-20μm5gPCTVanillicacidAnti-OAT-1/SLC22A6阴离子转运蛋白-1抗体Anti-OAT-1/SLC22A6阴离子转运蛋白-1抗体48T/96TBR,98%AR,99.8%1gCollagenaseⅢCoumarinAnti-OAT-3阴离子转运蛋白-3抗体Anti-OAT-3阴离子转运蛋白-3抗体48T/96TVEGFR3英文名称Striatin 3肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体
    BR,98%99.9%metalsbasis25gCollagenaseIVanillinAnti-OAT4L/URAT1尿酸盐重吸收转运子1抗体Anti-OAT4L/URAT1尿酸盐重吸收转运子1抗体48T/96TVimentin英文名称Striatin 4线粒体裂变1蛋白抗体
    BR,98%99.9%metalsbasis5gCollagenaseIIDiosmetinAnti-Ghrelin/GHRP生长激素释放肽抗体Anti-Ghrelin/GHRP生长激素释放肽抗体48T/96TVIP英文名称SCN7A叉头蛋白P1抗体
    羟脯氨酸测定试剂盒(碱水解法)(测动物血清、组织、尿液)说明书Relaxin酰乌头

    Relaxin H2香叶醇
    tetrahydrobiopterin积雪草酸
    Death receptor 5巴马亭红
    Death receptor 3吴茱萸新
    Stanniocalcin 2胡麻属苷
    Stanniocalcin 1酸枣仁皂苷A
    mitogen activited protein kinase油酸
    mitogen activited protein kinase 4高香草酸
    mitogen activited protein kinase 325-羟基原人参二醇
    操作步骤(仅供参考):
    1、羟脯氨酸测定试剂盒(碱水解法)(测动物血清、组织、尿液)说明书贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


     

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    • 尿羟脯氨酸测定法

      尿羟脯氨酸正常范围: 1~5岁:150~496μmol/d; 6~10岁:270~755μmol/d; 11~14岁4:80~137μmol/d;成人:150~420μmol/d. 检查介绍:尿液检查医`学教育网搜集整理。 临床意义:增高:羟脯氨酸血症,骨折,原发或继发性甲状旁腺功能亢进症,软组织损伤等。

    • ELISA 实验 FAQs 之试剂盒、样本

      、稳定性等性能会优于科研试剂盒。 Q2:试剂盒能否分次使用?没有用完的试剂组分如何存放? A2:试剂盒可以分次使用。我们的酶标板条是可拆卸的,您可以根据实验需求,确定每次实验所需的酶标板条数量及各试剂组分含量。 溶解后的标准品,建议以最高浓度/母液,分装保存于 -20℃ 条件下,避免反复冻融,半个月内使用有效。 生物素化抗体工作液及 HRP 酶结合物工作液需现配现用。未用完的浓缩液及其他组分,需要按照说明书要求,分别及时地保存于 2~8℃/-20℃ 条件下,一般可存放 6 个月。 样本 Q1

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