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- 文献和实验
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- 库存:
30
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 保存条件:
2-8℃冷藏
- 规格:
48T
规格: 48T
分类 恒温荧光法
选择方法:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性zui好;
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询我公司使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
动物组织匀浆的制备:
1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的溶液)或者0.86%的盐水于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。
① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
③ 超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定。
对于测定结果的判定主要分定性和定量两种:
①定性测定:定性测定的结果判断一般分为"阳性"和"阴性"两种。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应,"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在间接法和夹心法ELISA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。
②定量测定:在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
A.测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线最高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。
B.测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。
ELISA的操作要点:
1)标本的采取和保存:可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本;
2)试剂的准备:所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液;
3)加样:一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。
4)保温:ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育。
5)洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6)显色和比色:显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7)结果判断:分定性判定和定量判定。
要点:
☆标本的采取和保存:可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本;
试剂的准备:所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液;
加样:一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。
保温:ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育。
洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
显色和比色:显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
结果判断:分定性判定和定量判定。
组织HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次 (+)-Noe's reagent 87248-50-8 中文名:(+)-核欧沃豪斯效应试剂 分子式:C24H38O3 度:98.0% 关键词:
组织HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性检测试剂盒20次 2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid 中文名: 分子式:C14H11ClO3 度:98.0%
组织HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次 2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline 109113-72-6 中文名: 分子式:C10H9ClN2 度:98.0%
组织HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定性检测试剂盒20次 2-(Morpholinodithio)benzothiazole 中文名:2-(4-吗啉基二硫代)苯并噻唑 分子式:C11H12N2OS3 度:98.0%
组织HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次 2,2'-Anhydro-5-methyluridine 22423-26-3 中文名:2,2'-O-脱水-5-甲基尿嘧啶核苷 分子式:C10H12N2O5 度:98.0% 关键词:
Tetracaine 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 札如病毒(SV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
Testosterone undecanoate 中文名:十一酸睾酮 分子式:C30H48O3 人星状病毒(HastV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
Testosterone isocaproate 中文名:异己酸睾酮 分子式:C25H38O3 肉毒杆菌(A/B型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
Testosterone enanthate 中文名:庚酸睾酮 分子式:C26H40O3 肉毒杆菌(E/F型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
Testosterone decanoate 中文名:癸酸睾酮 分子式:C29H46O3 蔗糖测定试剂盒(紫外比色法)
阿莫曲普坦 N-氧化物 Almotriptan N-Oxide 质量规格:美国进口 英文名称RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)规格:96T/48T
阿糖腺苷一水物 Vidarabine Monohydrate 质量规格:美国进口 英文名称Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISAKit规格:96T/48T
盐酸倍他司汀-d3 Betahistine-d3 Dihydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISAKit规格:96T/48T
倍他司汀一盐酸盐 Betahistine Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatLpaELISAKit大鼠脂蛋白(Lpa)规格:96T/48T
倍他司汀-d3 β-Histine-d3 质量规格:美国进口 英文名称RatLpaELISAKit大鼠脂蛋白(Lpa)规格:96T/48T
比索洛尔 Bisoprolol 质量规格:美国进口 英文名称RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)规格:96T/48T
去异丙氧基比索洛尔 Des(isopropoxyethyl) Bisoprolol 质量规格:美国进口 英文名称Ratlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKIT大鼠LFA-3(CD58)规格:96T/48T
4-(2-Hydroxy-3-isopropylaminopropoxy)benzoic Acid (Bisoprolol Metabolite) 4-(2-Hydroxy-3-isopropylaminopropoxy)benzoic Acid (Bisoprolol Metabolite) 质量规格:美国进口 英文名称Ratlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKIT大鼠LFA-3(CD58)规格:96T/48T
N-去丁基布比卡因 N-Desbutyl Bupivacaine 质量规格:美国进口 英文名称RatMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISAKit规格:96T/48T
布替萘芬 Butenafine 质量规格:美国进口 英文名称RatMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISAKit规格:96T/48T
铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)说明书英文名称RatLaminaPropriaLymphocyte大鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格:96T/48T 阿莫曲普坦代谢产物M2 Almotriptan Metabolite M2 质量规格:美国进口
英文名称RatLBP大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)规格:96T/48T 阿莫曲普坦-d6 Almotriptan-d6 质量规格:美国进口
英文名称RatLDL-IC大鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)规格:96T/48T 阿莫曲普坦盐酸盐 Almotriptan Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatLDL-IC大鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)规格:96T/48T 阿莫曲普坦 N-氧化物 Almotriptan N-Oxide 质量规格:美国进口
英文名称Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)规格:96T/48T 阿糖腺苷一水物 Vidarabine Monohydrate 质量规格:美国进口
英文名称Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)规格:96T/48T 盐酸倍他司汀-d3 Betahistine-d3 Dihydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatLpa大鼠脂蛋白(Lpa)规格:96T/48T 倍他司汀一盐酸盐 Betahistine Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatLpa大鼠脂蛋白(Lpa)规格:96T/48T 倍他司汀-d3 β-Histine-d3 质量规格:美国进口
英文名称RatLPS大鼠脂多糖(LPS)规格:96T/48T 比索洛尔 Bisoprolol 质量规格:美国进口
英文名称Ratlymphocytefunctionassociatedaigen-3大鼠LFA-3(CD58)规格:96T/48T 去异丙氧基比索洛尔 Des(isopropoxyethyl) Bisoprolol 质量规格:美国进口
铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)说明书ELISA测定错误的原因分析:ELISA测定出现假阳性和假阴性的结果,主要有标本因素、试剂因素和操作因素,其中标本因素主要由干扰性物质所致,分内源性和外源性两种。仅供科研使用
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文献和实验法是一项新型的核酸扩增技术,一小时内可以检测出IHHNV结果。广州双螺旋基因技术有限公司根据恒温PCR原理,研发出Dhelix-C水产病害检测仪,配合使用恒温荧光法IHHNV核酸检测试剂盒,在65°C的恒温条件下反应,利用Bst DNA聚合酶完成置换扩增。反应体系中含有荧光染料,Dhelix-C水产病害检测仪能通过光学软件检测扩增后荧光信号的变化,将荧光信号表达为扩增曲线,同时仪器自动判读检测结果,从取样到结果显示仅需1~2个小时,仪器操作简单,非专业背景人员也可以轻松掌握,更适用于对虾IHHNV现场
【求助】如何提取细胞中的cAMP?和普通蛋白的裂解buffer一样么?
磷酸二酯酶抑制剂。 贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解Buffer,有时要加磷酸二酯酶抑制剂。 关于是否需要乙酰化的问题,不同的试剂盒有不同的要求,主要取决于抗体是否灵敏,也取决于最后检测的方法。一般乙酰化之后可以提高10倍的检测灵敏度。如果抗体灵敏,可以免去乙酰化的那一步,太容易引入误差。 另外,如果用荧光法、发光法检测碱性磷酸酶或者辣根过氧化物酶的话,也没必要进行乙酰化,因为荧光法、发光法检测比显色法检测灵敏度高。 另外,Promega公司有基于培养细胞的cAMP检测试剂盒
方法没有离子辐射且价格便宜,其成本约为几千美元。这种装置的另一个优点是它的工艺及实施以常用的光盘和单元电话为基础的,从而简便、易行。 5.2 分子信标技术用于SARS的诊断 2003年SARS病毒在中国内地的出现以及在全球部分国家的肆意和传播,给人类健康提出了严峻的挑战。许多国家的科研人员都在开发快速和精确检测SARS病毒的方法和技术,诸如RT-PCR、ELISA、免疫荧光法等,并已经在推出相应的检测试剂盒。但是,目前这些检测仍然需要结合临床体征的判断,这主要是由于这几种方法还存在
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