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RNAsafe 高效 RNas
企业认证
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29
12 个月
上海西格
2-8°C
5ml
保存条件:-20℃保存半年以上。
产品介绍:RNAsafe 含有数种特殊化合物,可使 RNase 失活,高效去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的 RNase,从而防止 RNA 的降解。RNAsafe 可用于制备 RNA 悬浮液,并可加入到各种 RNA 的反应液中(如体外转录、逆转录、RT-PCR、探针制备、分子杂交、Nuclease Protection Assay 等)。灭活可能存在的微量 Rnase 污染,保持 RNA 稳定性,获得更佳实验结果。产品特点:1. 适合于各种缓冲液,包括不能由DEPC处理的Tris及MOPS缓冲液系统等。2. 安全,方便地去除溶液中微量的RNase。3. 处理过的溶液随时可以再处理(60℃ 10-20 min),以去除任何可能发生的后续RNase污染。4. 不影响逆转录酶、RNA聚合酶和耐热DNA聚合酶的活性,可用于逆转录和体外转录反应。5. 处理后不需高压灭菌。使用方法:1. 本品为 20×浓缩液,在待处理的一般溶液或反应缓冲液中稀释 20×RNAsafe 到终浓度为 1×的工作浓度。如:95μl 待处理溶液中可加 5μl RNAsafe。2. 60℃处理 20 min 以使 RNase 失活。经 RNAsafe 处理后的溶液冷却至室温即可使用。处理过的溶液可再次处理(60℃ 10-20 min),以去除存储过程中可能发生的 RNase 污染。溶液冷却到室温后再加入逆转录酶等对高温敏感的酶制剂。PCR 反应需要使用哪些试剂?一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物; PCR反应基本步骤:一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:变性(Denaturation):利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。退火或称接合,复性(Annealling):在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。延伸(Extension):DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。公司供应的相关产品:
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