- 询价
- 上海研生
- YSRIBIO-C1078
- 进口
- 2025年07月10日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
25
- 英文名：
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50次
一、Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒价格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒价格英文名称：Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
产品规格：50次
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种采用AnexinV-AlexaFluor488与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。AnexinV具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色，因此通常将AnexinV与PI配合染色，以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
操作步骤
1、细胞样品的准备
a．对于贴壁细胞小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按13稀释BindingBuffer(4mlBindingBuffer+12ml去离子水)。
3、用250μlBindingBuffer重新悬浮细胞，调节其浓度为1×106/ml。
4、取100μl的细胞悬液于5ml流式管中，加入5μlAnexinV-AlexaFluor488和10μl20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育15分钟。
6、在反应管中加400μlPBS，流式细胞仪(FACS)分析。
AnexinV-AlexaFluor488PI双染流式分析图谱
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用AnexinV-AlexaFluor488/PI双染流式分析图谱
储存条件2～8℃，避光保存
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
4'-氨基-6-羧基荧光素磷脂酰醇胺/醇胺磷酸甘油酯/脑磷脂/L-α-磷酯酰醇胺/1,2-二脂酰-sn-甘油-3-磷酸-O-醇胺/3-Sn-磷脂酰醇胺/PE/Cephalin
2-氟-6-腈N-溴代二酰亚胺/N-溴代琥珀酰亚胺/溴二酰亚胺/NBS
4-巯基-4-基-2-N-羟基-5-降烯-2，3-二酰亚胺/N-羟基-5-降稀-2,3-二酰亚胺/HONB
3-基-4-氨N-基顺烯二酰亚胺/1-基-1H--2,5-二酮/N-基失水苹果酰亚胺/N-基马来酰亚胺/NEMI/NEM
4-基-L-苯氨酸N，N-二异基碳二亚胺/N,N-二异基碳二酰亚胺/N,N-二异基碳酰亚胺/DIC/DIPCDI
N-酰基-5'-O-(4,4'-二氧基三苯基)-2'-氧基胞苷N，N-二环己基碳二亚胺/N，N-二环己基碳酰亚胺/DCC/DCCI
2'-OMe-Ac-C亚磷酰胺单体化1-环己基-3-（3-三氨基）碳二亚胺/水溶性碳二亚胺/CDC
1-溴-3-基-2-酮三盐酸亚精胺/Spermidine trihydrochloride
4-溴-3-三氟基吡唑东莨菪碱盐/东莨菪碱/Scopolamine hydrobromide trihydrate
Dimethylammoniumdichlorotri(mu-chloro)bis[(R)-(+)-酸酯
Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒价格Z-D-PhenylalaninolN-羰基-D-10克BR，
Z-DL-phenylalanineN-羰基-DL-基5克
Z-D-Leu-OHN-羰基-D-亮500克BR，
Z-D-alanineN-CBZ-D-25克
Z-Asn-OHN-羰基-L-天冬酰250毫克BR，
Yttrium oxide钇10克BR，97%
Yariv′s ReagentYariv′s Reagent250毫克高，95%
xylo-oligosaccharides木寡糖100克高，500U高，
Xylenol Orange二桔黄1克IND
Xylene cyanole FF性蓝14725克BR，99%
Xylene cyanole FF二花黄FF500克高，
Xylene blue性蓝1100克
Xylanase木聚糖酶100克精制级，2000U/mg
Xylan半木质0.25UN超，
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验cells treated with 1 µM camptothecin. The externalized phosphatidylserine, a characteristic of early-stage apoptotic cells, was detected with Alexa Fluor 488 annexin V (A13201). The late-stage apoptotic and necrotic cells were stained with propidium
技术原理与方法｜超级色差校正物镜 PLAPON60XOSC 在脑组织四重免疫荧光分析中的应用
种类型的荧光抗体在单个标本中准确展示荧光标记分子的共定位情况。 PLAPON60XOSC 和 UPLSAPO60XO 的性能比较 2. 超级色差校正物镜的应用-脑组织的四重免疫荧光 图 1. 脑组织的四重免疫荧光。 VIAAT 染色（Alexa Fluor405，蓝色）；CB1 染色（Alexa Fluor488，绿色）；VGluT3 染色（Cy3，红色）；DGLα染色（Alexa Fluor647，白色）。 大麻素合成酶 DGLα（白色）和大麻素受体 CB1（绿色）聚集在小鼠
-binding protein that has a high affinity for PS. Annexin V labeled with a fluorophore or biotin can identify apoptotic cells by binding to PS exposed on the outer leaflet. 主要试剂 Alexa Fluor® 488 annexin V Propidium iodide PBS [Details
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
