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- 2025年12月28日
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- 提供商：
艾柏森生物
- 服务名称：
Elispot实验
| 步骤 | 服务内容 | 服务描述 |
| 1 | 实验方案设计 | 根据客户需求设计实验方案 |
| 2 | 包被96孔板 | 乙醇浸润96孔板中的PVDF膜；加入捕获抗体，封闭板中空白位点 |
| 3 | 细胞刺激和细胞因子捕获 | 从新鲜血液中分离PBMC并进行计数后，将细胞用培养液稀释后加入96孔板中。细胞数量需要优化，最好进行备比稀释以确定合适的细胞数量。孵育。用含Tween 20 的PBS孵育，去除细胞和未结合的细胞因子。随后洗涤 |
| 4 | 加入检测抗体检测 | 加入标记的检测抗体，孵育；加入底物显色或者荧光直接检测；适时终止反应 |
| 5 | 结果分析 | 将96孔板干燥；使用读板仪进行数据收集读取；分析实验结果 |
| 实验报告 | 上述各步骤所用试剂、实验结果、数据分析均可提供完整实验报告，可以根据客户需求定制服务（如更换实验所用条件试剂盒等等） |
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文献和实验相关实验
相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） 图注：ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生IFN- 的T细胞与一百万个抗原 呈现细胞（Antigen Presenting Cells，APC）混合后，使用ELISPOT 法（上图）、胞质内染法（中图）和ELISA 法（下图）分别测量产生IFN- 的细胞的数目。 1、ELISPOT 分析使单细胞分泌产物可视
仪，读取分析数据，ELISPOT平板放入自封袋室温保存。 以上是我们实验室常用的elispot的流程，供大家参考。也请大虾们不吝赐教，给以建议和帮助。
ELISPOT 1. PBS溶解抗原为30 μg/ml，加100 μl/孔于PVDF膜铺底的96孔灭菌板过夜； 2. 第二天吸去包被液后，加5％FCS的PRMI 1640培养基100 μl封闭1小时，37 o C； 3. 准备脾细胞悬液（用氯化铵去除红细胞，制备成单个脾淋巴细胞悬液）； 4. 从1 × 106 /孔开始，按1:3的稀释度开始逐孔稀释做不同浓度梯度，并做3个复孔，37 o C静置培养5小时
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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