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- 蛋白质免疫印迹实验（Western Blot，WB ）_生物科研实验外包服务
- 山东青岛
- 2026年01月12日
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青岛菲优特检测有限公司
- 服务名称：
蛋白质免疫印迹实验（Western Blot，WB ）_生物科研实验外包服务
- 规格：
项
实验方法原理
蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)可检测蛋白，判断导入的目的基因是否表达出相应分子量的蛋白以及表达蛋白量是否符合预期要求。蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。
实验步骤：
1. 收集蛋白样品
2.电泳： SDS-PAGE凝胶配制 、样品处理、上样与电泳
3.转膜
4.封闭
5.一抗孵育
6.二抗孵育
7.蛋白检测
8.膜的重复利用
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杂交膜的选择是决定 Western blot成败的重要环节。应根据杂交方案、被转 移蛋白的特性以及分子大小等因素，选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。用于Western blot的膜主要有两种：硝酸纤维素膜(NC) 和 PVDF 膜。NC 膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物，在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起， 但在非离子型的去污剂作用 下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔 径的 NC 膜。因为随着膜孔径的不断
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