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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
250ml×3
1.瑞氏-姬姆萨复合染液规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:瑞氏-姬姆萨复合染液规格英文名称:
产品规格:250ml×3
发货周期:1~3天
瑞氏-姬姆萨染液主要应用于血液和骨髓涂片染色。
试剂组成
试剂一250ml*1瓶
试剂二250ml*2瓶
操作步骤
1.平置血涂片于染色架上,滴加试剂一3-5滴,使其迅速盖满血膜,染色1分钟左右,以固定血片。
2.不要倒丢试剂一,直接滴加试剂二6-10滴,轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,染5-8分钟。
3.水洗30分钟,待干后镜检。
染色结果
1.红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2.白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。?其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。?单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。?淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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酰肼瑞氏姬姆萨复合染/瑞氏吉姆萨复合染/Wright-Giemsa stain
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BOCL酪英文名(EN)2,3Thiophenedicarboxaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
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BOCL脯英文名(EN)2(Trifluoromethyl)benzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)5G
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文献和实验为止。 ③ 装入玻璃瓶内密封,在室温下保存一周即可使用。 ④ 新鲜配制的染料偏碱性,放置后呈酸性,染液储存时间越久,染色愈好。 器材: 显微镜,香柏油,载玻片,盖玻片,玻片水平支架,采血针或注射器,计数器,小滴管,蜡笔,消毒棉球,瑞氏染液,pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液,姬姆萨染液,蒸馏水。 实验步骤 1. 血涂片的制作:取一滴血(采血方法见实验49),滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片,右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方,然后向后拉,当与血滴接触后,血即均匀附在二
。常用者为瑞氏(Wright’s)染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。试剂与器材 试剂: 染色液的配制: 1. 姬姆萨(Giemsa)染液的配制 (1)原液配制 Giemsa 粉剂 0.8 g 甘油(医用) 50 ml 甲醇 50 ml 将Giemsa粉剂溶于甲醇中,在乳钵中充分研磨,溶解后再加甘油,混合均匀,置于37~40℃温箱内8~12h,过滤,装入棕色试剂瓶内,密封保存备用。 (2)稀释液 临用时取Giemsa原液5ml,加磷酸盐缓冲液(pH6.4~
血液细胞染色是临床检验技师考试的部分内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 瑞氏染色法是最经典、最常用染色法,尤其对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果,但对细胞核的着色能力略差。姬姆萨染液对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好,结构更清晰,但对细胞质成分的着色能力略差。采用瑞氏一姬姆萨复合染液可使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。 瑞氏染料的质量规格用吸光度比值(rA)来评价,rA测定方法:取瑞氏染液15~25μl,加甲醇10ml稀释
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