CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒

碧云天生产的CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒(CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit)，简称CTL发光法细胞活力检测试剂盒或CTL，是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超高灵敏度、超宽线性范围定量检测活细胞数目的试剂盒。
本试剂盒的性能基本达到甚至在有些方面优于国外同类产品。本产品的用途与CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay(简称CTL Plus)及Promega公司的CellTiter-Glo^® Luminescent Cell Viability Assay(简称CellTiter-Glo^®或CTG)基本相同，检测灵敏度和发光检测数据略优于CTL Plus，显著优于CTG，线性范围和CTL Plus和CTG相近，但检测上限和发光检测数据随时间的稳定性稍稍低于CTL Plus和CTG。本产品与CTL Plus和国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1。
本产品线性范围宽。96孔板中，在12个至3万个细胞范围内有良好的线性关系。不同细胞的检测数量上限会有显著不同。如果检测的细胞数量超过3万，推荐使用检测上限更高的CellTiter-Lumi™ Plus发光法细胞活力检测试剂盒(C0068)。
本产品发光强度高。对于相同的细胞样品，通常在3万个细胞数量范围内，本产品的发光效果比CTL Plus强约20-100%，比国外同类产品强1-3倍，实测效果会因细胞种类的不同而有所不同。例如，对于NIH3T3和HeLa细胞的检测，CTL的发光强度比CTL Plus高约40-100%，比国外同类产品强约2-3倍；而对于Jurkat细胞的检测，CTL的发光强度则比CTL Plus强约20-70%，比国外同类产品强约1.5-3倍(图1D)。
本产品检测灵敏度高。使用本产品检测细胞数量仅为25个/孔时，发光强度可达空白孔的2倍左右。本产品与CTL Plus和国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1。

图1. 本产品CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL)和同类产品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay (CTL Plus)及国外同类产品(Competitor P)对不同细胞的检测效果。图A-C为CTL、CTL Plus和Competitor P对不同数量HeLa细胞在白色96孔板中的检测效果，图D为CTL、CTL Plus和Competitor P对2.5万个/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat细胞在白色96孔板中的检测效果。实际读数会因细胞种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本产品操作简单，读数稳定，检测速度快，完成检测仅需约10分钟。本产品比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的单一即用型试剂CellTiter-Lumi™发光法检测试剂与培养细胞等体积混合，反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液。并且化学发光比较稳定，在反应开始后的10分钟内下降不超过10%，30分钟内的下降不超过30%。
本产品稳定性好。本试剂盒中的CellTiter-Lumi™发光法检测试剂稳定性好，反复冻融5次对检测效果基本无影响，反复冻融10次检测效果下降不超过10%。本产品4℃保存3天对检测效果无显著影响，4℃保存7天检测效果下降不超过10%。室温保存1天，仍可保留80%以上的检测效果。37℃保存1天，可保持60%以上的检测效果。
本产品使用灵活便捷。本产品不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量筛选(high-throughput screening)检测。
ATP，作为最重要的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标，也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子，并和活细胞数目成良好的线性关系。因此，ATP含量能很好地反应活细胞的数目，即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。
本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参见图2。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应，ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目，而ATP含量和发光强度成正比，这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。

图2. 本试剂盒检测ATP的原理图。

碧云天各种细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择，请参考http://www.beyotime.com/cell-proliferation.htm
对于96孔板，推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂，总体积为200μl，此时本试剂盒每10ml可以进行100次检测。对于384孔板，推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂，总体积为50μl，此时本试剂盒每10ml可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测，但细胞培养液和检测试剂体积的比例须为1:1。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
C0065S	CellTiter-Lumi™发光法检测试剂	10ml
C0065M	CellTiter-Lumi™发光法检测试剂	10ml×5
C0065L	CellTiter-Lumi™发光法检测试剂	50ml×5
C0065XL	CellTiter-Lumi™发光法检测试剂	100ml×10
—	说明书	1份

保存条件：
-20℃避光保存，至少一年有效。
注意事项：
本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，第一次解冻后可适当分装保存，但需注意分装的容器不能有ATP污染。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。
待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰萤光素酶反应，从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。经测试，最终反应体系中DMSO含量在2%以内不会对反应产生影响。
检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。
使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。