EHA101 感受态细胞100ul*10

产品名称：EHA101 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：根癌农杆菌感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

EHA101 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
EHA101 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
EHA101 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
VCL Others Human 人 VCL / Vinculin 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸阿莫罗芬/盐酸阿莫洛芬 （标准品）Amorolfine hydrochloride质量规格：HPLC>98%,标准品
木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL氨苄西林钠/氨苄青霉素钠Ampicillin Sodium质量规格：>900μg/mg, USP,BR
BEL-7402人肝癌细胞 BEL-7402 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS氨苄西林钠(标准品)Ampicillin Sodium质量规格：标准品用于含量测定
IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白 (His 标签)扁桃苷/苦杏仁苷Amygdalin质量规格：>98%,BR
人肺微血管内皮细胞 (HPMEC)( 5×105 ) rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞 Rattus扁桃苷/苦杏仁苷(标准品)Amygdalin质量规格：HPLC≥98%,标准品
大鼠背部脊髓神经元(RDSCI)(1×106)硝酸布康唑Butoconazole nitrate质量规格：>98%,BR
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36阿卡波糖Acarbose 质量规格：>97%,细胞培养级
615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠膀胱上皮细胞完全培养基 100mL阿卡波糖(标准品)Acarbose 质量规格：HPLC>95%,标准品
MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞 Mouse阿昔洛韦,无环鸟苷Acyclovir质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
IL12RB2 Others Mouse 小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿昔洛韦,无环鸟苷(标准品)Acyclovir质量规格：HPLC>98%,标准品
西洛他唑（标准品）  Cilostazol  质量规格：HPLC>98%,标准品 RatNeuroglobin,NGBELISA试剂盒大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
顺铂(进分)  Cisplatin   质量规格：进分Sigma P4394  RatNeuron-specificenolase,NSEELISAKit大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
顺铂  Cisplatin   质量规格：>98.5%,细胞培养级,BR RatNeuron-specificenolase,NSEELISA试剂盒大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
顺铂（标准品）  Cisplatin   质量规格：HPLC>98%,标准品 RatNeuroophin3,-3ELISAKit大鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克拉曲滨,克拉利宾  Cladribine  质量规格：>99.0%,USP34,BR,可用于细胞培养 RatNeuroophin3,-3ELISA试剂盒大鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克拉霉素  Clarithromycin   质量规格：>97%,USP34,BR RatNeuroophin4,-4ELISAKit大鼠神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克拉霉素（标准品）  Clarithromycin   质量规格：HPLC>95%,标准品 RatNeuroophin4,-4ELISA试剂盒大鼠神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克林霉素酯  Clindamycin Phosphate  质量规格：克林霉素含量>758μg/mg,USP32 RatneuropeptideY,NP-YELISAKit大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克林霉素酯(标准品)  Clindamycin Phosphate  质量规格：用于含量测定 RatneuropeptideY,NP-YELISA试剂盒大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒规格：96T/48T
克罗拉滨/氯法拉滨  Clofarabine  质量规格：> 99%,BR,可用于细胞培养 Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
EHA101 感受态细胞100ul*10RatNeuroglobin,NGB大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒规格：96T/48T 西洛他唑  Cilostazol  质量规格：>99%,USP34
RatNeuroglobin,NGBELISA试剂盒大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒规格：96T/48T 西洛他唑（标准品）  Cilostazol  质量规格：HPLC>98%,标准品
RatNeuron-specificenolase,NSE大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒规格：96T/48T 顺铂(进分)  Cisplatin   质量规格：进分Sigma P4394
RatNeuron-specificenolase,NSEELISA试剂盒大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒规格：96T/48T 顺铂  Cisplatin   质量规格：>98.5%,细胞培养级,BR
RatNeuroophin3,-3大鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T 顺铂（标准品）  Cisplatin   质量规格：HPLC>98%,标准品
RatNeuroophin3,-3ELISA试剂盒大鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T 克拉曲滨,克拉利宾  Cladribine  质量规格：>99.0%,USP34,BR,可用于细胞培养
RatNeuroophin4,-4大鼠神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 克拉霉素  Clarithromycin   质量规格：>97%,USP34,BR
RatNeuroophin4,-4ELISA试剂盒大鼠神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 克拉霉素（标准品）  Clarithromycin   质量规格：HPLC>95%,标准品
RatneuropeptideY,NP-Y大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒规格：96T/48T 克林霉素酯  Clindamycin Phosphate  质量规格：克林霉素含量>758μg/mg,USP32
RatneuropeptideY,NP-YELISA试剂盒大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒规格：96T/48T 克林霉素酯(标准品)  Clindamycin Phosphate  质量规格：用于含量测定