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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
45
- 英文名:
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*10
产品名称:GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10
规格:50ul*10
分类:根癌农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
原代表皮角化细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml盐酸伐昔洛韦-d4Valacyclovir-d4, Hydrochloride质量规格:美国进口
SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸伐昔洛韦水合物Valacyclovir hydrochloride hydrate质量规格:美国进口
中国仓鼠卵巢细胞;CHO17-酮基维库溴铵17-Keto Vecuronium Bromide质量规格:美国进口
中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24 涎腺腺样囊性癌细胞,Acc-2细胞 104C1细胞,转化的豚鼠胎体细胞3-去乙酰基维库溴铵3-Desacetyl Vecuronium质量规格:美国进口
人肾小管上皮细胞;HKC玉米素核苷同分Zeatin riboside mixed Isomers质量规格:美国进口
人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1苯妥英钠Phenytoin sodium质量规格:>99%,BR
PON3 Others Human 人 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 阿扎那韦(标准品)Atazanavir质量规格:HPLC>98%,标准品
CM-R046大鼠肠上皮细胞完全培养基100mL盐酸托莫西汀Atomoxetine HCl质量规格:>99%,BR
RL95-2, 人子宫内膜腺癌细胞系 羊膜细胞,H.A.细胞 WERI-Rb-1(人视网膜母细胞瘤)盐酸托莫西汀(标准品)Atomoxetine HCl质量规格:HPLC>99%,标准品
小鼠色素瘤细胞;B16阿托伐醌,阿托喹酮Atovaquone质量规格:>98.5%,USP32,BR,可用于细胞培养
小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:0.8%内酯含量,BR 大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Rat angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit
小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:>98%标准品 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 96T/48T
利扎曲坦 Rizatriptan 质量规格:>98% 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit
地瑞那韦乙醇盐 Darunavir Ethanolate 质量规格:>99%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T
维拉佐酮 Vilazodone 质量规格:>98.5%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
达比加群 Dabigatran 质量规格:>98%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)抗体免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit
瑞格列奈 Repaglinide 质量规格:>99%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit
瑞格列奈(标准品) Repaglinide 质量规格:>99%,BR 大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Ratangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
D-阿拉伯糖 D-(-)-Arabinose 质量规格:>98%,BR 大鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒 Rat angiotensinogen,aGT ELISA Kit
D-阿拉伯糖(标准品) D-arabinose 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10大鼠血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒 Rat Vasoactive Iestinal Peptide,VIP ELISA Kit 醋酸卡泊芬净 Caspofungin Acetate 质量规格:>97%,BR
大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Rat angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit 小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:0.8%内酯含量,BR
大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅠ,Ang-Ⅰ 96T/48T 小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:>98%标准品
大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit 利扎曲坦 Rizatriptan 质量规格:>98%
大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅡ,ANG-Ⅱ 96T/48T 地瑞那韦乙醇盐 Darunavir Ethanolate 质量规格:>99%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 维拉佐酮 Vilazodone 质量规格:>98.5%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)抗体免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit 达比加群 Dabigatran 质量规格:>98%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit 瑞格列奈 Repaglinide 质量规格:>99%,BR
大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Ratangiotensinogen,aGT 96T/48T 瑞格列奈(标准品) Repaglinide 质量规格:>99%,BR
大鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒 Rat angiotensinogen,aGT ELISA Kit D-阿拉伯糖 D-(-)-Arabinose 质量规格:>98%,BR
规格:50ul*10
分类:根癌农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
原代表皮角化细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml盐酸伐昔洛韦-d4Valacyclovir-d4, Hydrochloride质量规格:美国进口
SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸伐昔洛韦水合物Valacyclovir hydrochloride hydrate质量规格:美国进口
中国仓鼠卵巢细胞;CHO17-酮基维库溴铵17-Keto Vecuronium Bromide质量规格:美国进口
中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24 涎腺腺样囊性癌细胞,Acc-2细胞 104C1细胞,转化的豚鼠胎体细胞3-去乙酰基维库溴铵3-Desacetyl Vecuronium质量规格:美国进口
人肾小管上皮细胞;HKC玉米素核苷同分Zeatin riboside mixed Isomers质量规格:美国进口
人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1苯妥英钠Phenytoin sodium质量规格:>99%,BR
PON3 Others Human 人 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 阿扎那韦(标准品)Atazanavir质量规格:HPLC>98%,标准品
CM-R046大鼠肠上皮细胞完全培养基100mL盐酸托莫西汀Atomoxetine HCl质量规格:>99%,BR
RL95-2, 人子宫内膜腺癌细胞系 羊膜细胞,H.A.细胞 WERI-Rb-1(人视网膜母细胞瘤)盐酸托莫西汀(标准品)Atomoxetine HCl质量规格:HPLC>99%,标准品
小鼠色素瘤细胞;B16阿托伐醌,阿托喹酮Atovaquone质量规格:>98.5%,USP32,BR,可用于细胞培养
小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:0.8%内酯含量,BR 大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Rat angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit
小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:>98%标准品 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 96T/48T
利扎曲坦 Rizatriptan 质量规格:>98% 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit
地瑞那韦乙醇盐 Darunavir Ethanolate 质量规格:>99%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T
维拉佐酮 Vilazodone 质量规格:>98.5%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
达比加群 Dabigatran 质量规格:>98%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)抗体免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit
瑞格列奈 Repaglinide 质量规格:>99%,BR 大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit
瑞格列奈(标准品) Repaglinide 质量规格:>99%,BR 大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Ratangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
D-阿拉伯糖 D-(-)-Arabinose 质量规格:>98%,BR 大鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒 Rat angiotensinogen,aGT ELISA Kit
D-阿拉伯糖(标准品) D-arabinose 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞50ul*10大鼠血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒 Rat Vasoactive Iestinal Peptide,VIP ELISA Kit 醋酸卡泊芬净 Caspofungin Acetate 质量规格:>97%,BR
大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Rat angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit 小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:0.8%内酯含量,BR
大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅠ,Ang-Ⅰ 96T/48T 小白菊内酯 Parthenolide 质量规格:>98%标准品
大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit 利扎曲坦 Rizatriptan 质量规格:>98%
大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅡ,ANG-Ⅱ 96T/48T 地瑞那韦乙醇盐 Darunavir Ethanolate 质量规格:>99%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 维拉佐酮 Vilazodone 质量规格:>98.5%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)抗体免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit 达比加群 Dabigatran 质量规格:>98%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)免疫试剂盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit 瑞格列奈 Repaglinide 质量规格:>99%,BR
大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Ratangiotensinogen,aGT 96T/48T 瑞格列奈(标准品) Repaglinide 质量规格:>99%,BR
大鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒 Rat angiotensinogen,aGT ELISA Kit D-阿拉伯糖 D-(-)-Arabinose 质量规格:>98%,BR
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