BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul

产品名称：BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50
规格：100ul*50
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
中国仓鼠肺细胞;CHL 卵巢癌细胞，NIH:OVCAR-3细胞 L8824细胞，草鱼肝脏细胞氧化硒(>98%,Pract Grade)Selenium (IV) oxide质量规格：>98%,Pract Grade
人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1芝麻酚(>98%,BC)Sesamol质量规格：>98%,BC
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 粗孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography质量规格：20-60目,层析用
真皮成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)粗孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography质量规格：100-200目,层析用
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 粗孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography质量规格：300-400目,层析用
NCI-H1650细胞，人肺支气管癌细胞 小鼠前列腺癌细胞,RM-1细胞 CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基100mL比卡鲁胺（标准品）Bicalutamide质量规格：HPLC>98%,标准品
Raji(人Butt's淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2白消安Busulfan/Myleran质量规格：>98.5%,USP,可用于细胞培养
Promocell C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞生成培养基(即用型) 250ml白消安（标准品）Busulfan/Myleran质量规格：HPLC>98%,标准品
人骨髓间充质干细胞(hMSCs)洛莫司汀Lomustine质量规格：>98%,BR
TNFRSF12A Others Human 人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 人细胞裂解液 (阳性对照) 洛莫司汀（标准品）Lomustine质量规格：HPLC>98%,标准品
盐酸普罗帕酮  Propafenone Hydrochloride  质量规格：>98%,BR 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-2 ELISA Kit
呫吨酸（标准品）  Xanthene-9-carboxylic acid  质量规格：供检查用 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-3 ELISA Kit
呫吨酮（标准品）  Xanthone  质量规格：供HPLC法有关物质检查用 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
甲基丁香酚（标准品）  Methyl eugenol  质量规格：含量测定 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-4 ELISA Kit
香叶醇（标准品）  Geraniol  质量规格：含量测定 小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-5 ELISA Kit
（标准品）  Benzaldehyde  质量规格：含量测定 小鼠水通道蛋白9(AQP-9)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-9 ELISA Kit
卡维丁（标准品）  Cavidine  质量规格：含量测定 小鼠丝切蛋白1(CFL1)ELISA试剂盒 ，英文名： CFL1 ELISA Kit
5-羟色胺盐酸盐（标准品）  Serotonin hydrochloride   质量规格：含量测定 小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒 ，英文名： STK ELISA Kit
月见草油（标准品）  Evening primrose oil  质量规格：鉴别 小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
龙血素A（标准品）  Loureirin A   质量规格：含量测定 小鼠丝酸转肽酶抑制剂Kazal type 3(SPINK3)ELISA试剂盒 ，英文名： SPINK3 ELISA Kit
BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-0 ELISA Kit 苯妥英（标准品）  5,5-Diphenylhydantoin  质量规格：供IR鉴别用
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-1 ELISA Kit 金刚烷（标准品）  Adamantane  质量规格：供检查用
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 盐酸普罗帕酮（标准品）  Propafenone Hydrochloride  质量规格：供检查用
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-2 ELISA Kit 盐酸普罗帕酮  Propafenone Hydrochloride  质量规格：>98%,BR
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-3 ELISA Kit 呫吨酸（标准品）  Xanthene-9-carboxylic acid  质量规格：供检查用
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 呫吨酮（标准品）  Xanthone  质量规格：供HPLC法有关物质检查用
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-4 ELISA Kit 甲基丁香酚（标准品）  Methyl eugenol  质量规格：含量测定
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-5 ELISA Kit 香叶醇（标准品）  Geraniol  质量规格：含量测定
小鼠水通道蛋白9(AQP-9)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-9 ELISA Kit （标准品）  Benzaldehyde  质量规格：含量测定
小鼠丝切蛋白1(CFL1)ELISA试剂盒 ，英文名： CFL1 ELISA Kit 卡维丁（标准品）  Cavidine  质量规格：含量测定