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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
EHA105(pSoup) 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*100
EHA105(pSoup) 感受态细胞100ul*100注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
EHA105(pSoup) 感受态细胞100ul*100操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
Lec1仓鼠卵巢细胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培养基(GIBCO)+10%FBS盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼Procarbazine HCl质量规格:>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养
IGFBP5 Protein Canine 重组狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 标签)盐酸丙卡巴肼(标准品)Procarbazine HCl质量规格:HPLC>98%,标准品
EB (NBL-4) (牛胚气管细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂体细胞RPC盐酸丙卡特罗Procaterol HCl质量规格:>98.5%,CP2005,半水合物
胰腺导管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)丙泊酚Propofol质量规格:>98.0%,熔点18
FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸雷洛昔芬Raloxifene HCl质量规格:>98.5%,BR
PA317细胞,小鼠胚成纤维包装细胞 6T-CEM(T细胞白血病) 大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-12-羟基阿托伐他汀内酯-d52-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5质量规格:美国进口
EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)阿替洛尔(标准品)Atenolol质量规格:含量测定,HPLC>99%,标准品
A-427(人肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9阿托伐他汀钙Atorvastatin calcium质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养
人肺动脉内皮细胞总RNAHPAEC NA阿托伐他汀钙(标准品)Atorvastatin calcium质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠周神经成纤维细胞(MPNF)(5×105)阿扎胞苷/5-氮杂胞嘧啶核苷(进分)Azacitidine (5-Azacytidine)质量规格:> 98%,进分,Sigma A2385
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香荆芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香兰素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香叶醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香叶木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香叶木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
EHA105(pSoup) 感受态细胞100ul*100HumanNOD-likereceptor9,NLR 人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香草酸 HPLC≥97% 100mg
HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香草乙酮 HPLC≥98% 20mg
humanNoradrenaline,NA 人去甲(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香豆素 HPLC≥98% 20mg
HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNP 人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg
Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2A 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香荆芥酚 HPLC≥98% 50mg
Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2B 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香兰素 HPLC≥98% 20mg
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgG 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg
Humanparaoxonase,PON 人酶(PON)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香叶醇 HPLC≥98% 20mg
Humanpeptidoglycan,PG 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香叶木素 HPLC≥98% 20mg
HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPI 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香叶木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| EHA105(pSoup) 感受态细胞100ul*100 | 100ul*100 | 根癌农杆菌感受态细胞 |
EHA105(pSoup) 感受态细胞100ul*100操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
Lec1仓鼠卵巢细胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培养基(GIBCO)+10%FBS盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼Procarbazine HCl质量规格:>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养
IGFBP5 Protein Canine 重组狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 标签)盐酸丙卡巴肼(标准品)Procarbazine HCl质量规格:HPLC>98%,标准品
EB (NBL-4) (牛胚气管细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂体细胞RPC盐酸丙卡特罗Procaterol HCl质量规格:>98.5%,CP2005,半水合物
胰腺导管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)丙泊酚Propofol质量规格:>98.0%,熔点18
FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸雷洛昔芬Raloxifene HCl质量规格:>98.5%,BR
PA317细胞,小鼠胚成纤维包装细胞 6T-CEM(T细胞白血病) 大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-12-羟基阿托伐他汀内酯-d52-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5质量规格:美国进口
EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)阿替洛尔(标准品)Atenolol质量规格:含量测定,HPLC>99%,标准品
A-427(人肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9阿托伐他汀钙Atorvastatin calcium质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养
人肺动脉内皮细胞总RNAHPAEC NA阿托伐他汀钙(标准品)Atorvastatin calcium质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠周神经成纤维细胞(MPNF)(5×105)阿扎胞苷/5-氮杂胞嘧啶核苷(进分)Azacitidine (5-Azacytidine)质量规格:> 98%,进分,Sigma A2385
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香荆芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香兰素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香叶醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香叶木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香叶木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
EHA105(pSoup) 感受态细胞100ul*100HumanNOD-likereceptor9,NLR 人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香草酸 HPLC≥97% 100mg
HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1 人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香草乙酮 HPLC≥98% 20mg
humanNoradrenaline,NA 人去甲(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香豆素 HPLC≥98% 20mg
HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNP 人N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg
Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2A 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香荆芥酚 HPLC≥98% 50mg
Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2B 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香兰素 HPLC≥98% 20mg
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgG 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg
Humanparaoxonase,PON 人酶(PON)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香叶醇 HPLC≥98% 20mg
Humanpeptidoglycan,PG 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香叶木素 HPLC≥98% 20mg
HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPI 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香叶木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
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