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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
stable 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*5
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
产品名称:stable 电击感受态细胞50ul*5
规格:50ul*5
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
stable 电击感受态细胞50ul*5注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
CL-0049CA46(人Butts淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2异辛醇(分析标准品,≥99.5%)2-Ethyl-1-hexanol质量规格:分析标准品,≥99.5%
Hep G2, 人肝癌细胞系 胰腺导管上皮癌细胞,PAN-1细胞 A3(淋巴细胞白血病细胞)2-乙基-1,3-己二醇(标准品)2-Ethyl-1,3-hexanediol质量规格:分析标准品
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12甲基磺草酮(标准品)Mesotrione质量规格:分析标准品
IL1RAP Others Human 人 IL1R3 / IL1RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 癸酸甲酯(分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC))Methyl decanoate质量规格:分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC)
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-C十二酸甲酯(标准品)Methyl laurate质量规格:分析标准品
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1川陈皮素(标准品)Nobiletin质量规格:HPLC≥98%,标准品
MGC80-3细胞,胃癌细胞 人喉癌细胞,TU212细胞 正常大鼠肾细胞;NRK川楝素(标准品)Toosendanin质量规格:HPLC≥98%,标准品
杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12川芎嗪(标准品)Tetramethylpyrazine质量规格:HPLC≥98%,标准品
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人细胞裂解液 (阳性对照) 川芎嗪Tetramethylpyrazine质量规格:≥98%,BR
人间充质干细胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg川续断皂苷VI;木通皂苷D(标准品)Asperosaponin Ⅵ质量规格:HPLC≥98%,标准品
异槲皮苷(标准品) Isoquercitrin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠角蛋白9(K9)ELISA试剂盒 ,英文名: K9 ELISA Kit
异茴芹内酯 Isopimpinellin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
异类叶升麻苷;异毛蕊花糖苷(标准品) Isoacteoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA检测试剂盒Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 96T/48T
异绿原酸A(标准品) Isochlorogenic acid A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒 ,英文名: AR ELISA Kit
异绿原酸B(标准品) Isochlorogenic acid B 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠角化细胞生长因子(KGF/FGF-7)ELISA试剂盒 ,英文名: KGF/FGF-7 ELISA Kit
异绿原酸C(标准品) Isochlorogenic acid C 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠角质转谷酰胺酶(TGM1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGM1 ELISA Kit
异牡荆素(标准品) Isovitexin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠窖蛋白(CAV1)ELISA试剂盒 ,英文名: CAV1 ELISA Kit
异欧前胡素(标准品) Isoimperatorin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒 ,英文名: Cav-1 ELISA Kit
异嗪皮啶(标准品) Isofraxidin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠接触蛋白1(CN1)ELISA试剂盒 ,英文名: CN1 ELISA Kit
异去氢钩藤碱(标准品) Isocorynoxeine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠结肠癌抗原(CCA)ELISA检测试剂盒MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 96T/48T
stable 电击感受态细胞50ul*5小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 ,英文名: GDNF ELISA Kit 雷马曲班 Ramatroban;BAY u3405 质量规格:>98%,BR
小鼠胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 ,英文名: GDNF ELISA Kit 异钩藤碱(标准品) Isorhynchophylline 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角蛋白18(K18)ELISA试剂盒 ,英文名: K18 ELISA Kit 异荭草苷(标准品) luteolin-6-C-glucoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角蛋白9(K9)ELISA试剂盒 ,英文名: K9 ELISA Kit 异槲皮苷(标准品) Isoquercitrin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 异茴芹内酯 Isopimpinellin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA检测试剂盒Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/AR 96T/48T 异类叶升麻苷;异毛蕊花糖苷(标准品) Isoacteoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒 ,英文名: AR ELISA Kit 异绿原酸A(标准品) Isochlorogenic acid A 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角化细胞生长因子(KGF/FGF-7)ELISA试剂盒 ,英文名: KGF/FGF-7 ELISA Kit 异绿原酸B(标准品) Isochlorogenic acid B 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠角质转谷酰胺酶(TGM1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGM1 ELISA Kit 异绿原酸C(标准品) Isochlorogenic acid C 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠窖蛋白(CAV1)ELISA试剂盒 ,英文名: CAV1 ELISA Kit 异牡荆素(标准品) Isovitexin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
stable 电击感受态细胞50ul*5操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
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