Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*50

Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述：

产品名称	包装	分类
Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*50	100ul*50	表达感受态细胞

Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*50操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
人成纤维细胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞 Mouse盐酸戊乙奎（标准品）Penehyclidine Hydrochloride质量规格：含量测定
杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F33-奎宁醇（标准品）3-quinuclidinol质量规格：检查用
人视网膜内皮细胞 (HREC)( 5×105 )普伐他汀四甲基丁胺（标准品）Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine质量规格：含量测定
CM-M059小鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基100mL盐酸伊托必利（标准品）Itopride Hydrochloride质量规格：含量测定
小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6] 小鼠胰腺星状细胞完全培养基 100mL福辛普利钠（标准品）Fosinopril sodium质量规格：含量测定
EGF Others Human 人 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) 倍他米 21-醋酸盐Betamethasone 21-acetate质量规格：美国进口
人干细胞因子单克隆抗体细胞株;AMS2(SCF3)倍他米β-D-葡萄糖醛酸Betamethasone β-D-Glucuronide质量规格：美国进口
MEN Others Mouse 小鼠 Meteorin / MEN 人细胞裂解液 (阳性对照) 倍他米-21-1酸钠盐Betamethasone 21-phosphate sodium salt质量规格：美国进口
人脐血间质干细胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells比马前列腺素游离酸Bimatoprost, free acid质量规格：美国进口
MG-63细胞，人成骨肉瘤细胞 单增李斯特氏菌 表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的人胚肾细胞;293KB比马前列腺素酰胺Bimatoprost amide质量规格：美国进口
盐酸甲哌卡因  Mepivacaine HCl  质量规格：>99%,BR 大鼠特异生长因子(TSGF)免疫试剂盒 Rat Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit
安普那韦   Amprenavir  质量规格：>97% 大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)免疫试剂盒 Rat Aspaate Aminoansferase,AST ELISA kit
鲁比替康; 9-硝基喜树碱  Rubitecan  质量规格：>99% 大鼠铁蛋白(FE)ELISA检测试剂盒Ratferritin,FEELISAKit 96T/48T
泊洛沙姆407  Polyethylene-polypropylene glycol  质量规格：M.W12000，进口BASF分包 大鼠铁蛋白(FE)免疫试剂盒 Rat ferritin,FE ELISA Kit
长春质碱  Catharanthine hemitartrate  质量规格：>95%,BR 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA检测试剂盒RatHomocysteicacid,HcyELISAKit 96T/48T
硫酸长春质碱  Catharanthine sulfate  质量规格：>98%,BR 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)免疫试剂盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit
硫酸长春质碱(标准品)  Catharanthine sulfate  质量规格：>98%,标准品 大鼠铜蓝蛋白(CP)免疫试剂盒 Rat ceruloplasmin(ferroxidase)(CP)ELISA kit
康普瑞汀  Combretastatin A4   质量规格：>99%,细胞培养级 大鼠透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒RatHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T
土霉素  Oxytetracycline  质量规格：≥95%,BR 大鼠透明质酸(HA)免疫试剂盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
土霉素(进分)  Oxytetracycline  质量规格：930u/mg,进分 大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA检测试剂盒RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit 96T/48T
Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*50大鼠糖原合成酶免疫试剂盒 Rat glycogen syhetase ELISA Kit 依泽替米贝;依折麦布(标准品)  Ezetimibe  质量规格：HPLC>99%,标准品
大鼠特异生长因子(TSGF)免疫试剂盒 Rat Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit 盐酸甲哌卡因  Mepivacaine HCl  质量规格：>99%,BR
大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)免疫试剂盒 Rat Aspaate Aminoansferase,AST ELISA kit 安普那韦   Amprenavir  质量规格：>97%
大鼠铁蛋白(FE)ELISA检测试剂盒Ratferritin,FE 96T/48T 鲁比替康; 9-硝基喜树碱  Rubitecan  质量规格：>99%
大鼠铁蛋白(FE)免疫试剂盒 Rat ferritin,FE ELISA Kit 泊洛沙姆407  Polyethylene-polypropylene glycol  质量规格：M.W12000，进口BASF分包
大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA检测试剂盒RatHomocysteicacid,Hcy 96T/48T 长春质碱  Catharanthine hemitartrate  质量规格：>95%,BR
大鼠同型半胱氨酸(Hcy)免疫试剂盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit 硫酸长春质碱  Catharanthine sulfate  质量规格：>98%,BR
大鼠铜蓝蛋白(CP)免疫试剂盒 Rat ceruloplasmin(ferroxidase)(CP)ELISA kit 硫酸长春质碱(标准品)  Catharanthine sulfate  质量规格：>98%,标准品
大鼠透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒RatHyaluronicacid,HA 96T/48T 康普瑞汀  Combretastatin A4   质量规格：>99%,细胞培养级
大鼠透明质酸(HA)免疫试剂盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 土霉素  Oxytetracycline  质量规格：≥95%,BR