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Y1HGold 感受态细胞100ul*50

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  • 博湖
  • BH-G2244
  • 进口、国产
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      Y1HGold 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*50

    产品名称:Y1HGold 感受态细胞100ul*50
    规格:100ul*50
    分类:酵母感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    产品细节图片1
    Y1HGold 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    Y1HGold 感受态细胞100ul*50注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    Y1HGold 感受态细胞100ul*50操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
    小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7替卡西林(标准品)Ticarcillin disodium salt质量规格:含量测定,二钠盐

    FGFR2 Others Human FGFR2 / CD332 人细胞裂解液 (阳性对照) RGDArg-Gly-Asp 质量规格:>97%,integrin抑制剂
    小鼠子细胞;U14肝素锂Heparin lithium质量规格:>150IU/MG,BR
    IL18R1 Others Canine IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 促胰液素;胰泌素Secretin Acetate质量规格:>98%,BR
    HEC-1A, 人子宫内膜癌细胞系麝香草酚Thymol质量规格:AR
    人细胞;Hela S3 [HeLaS3]乙二醇苯(standard for GC,99.5%(GC))Ethylene glycol monophenyl ether质量规格:standard for GC,99.5%(GC)

    ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) O-去甲基美托洛尔O-Desmethyl Metoprolol质量规格:美国进口
    人成骨肉瘤细胞;MG-63草酸脱氢氨氯地平Dehydro Amlodipine Oxalate质量规格:美国进口
    IL12A&IL27B Others Human IL12A & IL27B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-氨氯地平(R)-Amlodipine质量规格:美国进口
    人脐带血单个核细胞阿瑞匹坦-标记d4Aprepitant - Labeled d4质量规格:美国进口
    头孢唑啉,唑啉头孢菌素  Cefazolin  质量规格:>99%,BR 调料乙酸激酶法定量检测试剂盒20

    头孢唑啉(标准品)  Cefazolin  质量规格:>99%,标准品 调料总乳酸比色法定量检测试剂盒20
    文多灵(标准品)  Vindoline  质量规格:HPLC98%,标准品 同酸待测样品处理试剂盒20
    茶碱(标准品)  Theophylline  质量规格:HPLC98%,标准品 6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA检测试剂盒Rabbit6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 96T/48T
    苯甲酰新乌头原碱(标准品)  Benzoylmesaconine  质量规格:HPLC98%,标准品 8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA检测试剂盒Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 96T/48T
    葫芦巴碱(标准品)  Trigonelline  质量规格:HPLC98%,标准品 Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA检测试剂盒RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 96T/48T
    琥珀酸;丁二酸  Succinic acid  质量规格:AR,>99% p53(p53)ELISA检测试剂盒Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 96T/48T
    琥珀酸;丁二酸(标准品)  Succinic acid  质量规格:>99%,标准品 p物质(SP)ELISA检测试剂盒RabbitSubstanceP,SPELISAKit 96T/48T
    α-乳香酸(标准品)  alpha-Boswellic acid  质量规格:HPLC98%,标准品 兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA检测试剂盒Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T
    野马追内酯A(标准品)  Eupalinolide A  质量规格:HPLC98%,标准品 兔阿霉素(ADR)ELISA检测试剂盒Rabbitadramycin,ADRELISAKit 96T/48T
    Y1HGold 感受态细胞100ul*50调料三醇比色法定量检测试剂盒20 吉西他滨  Gemcitabine  质量规格:>98%,free base

    调料乙醇比色法定量检测试剂盒20 沙利度胺(反应停)  Thalidomide   质量规格:>98%
    调料乙酸比色法定量检测试剂盒20 沙利度胺(标准品)  Thalidomide   质量规格:HPLC>98%,标准品
    调料乙酸激酶法定量检测试剂盒20 头孢唑啉,唑啉头孢菌素  Cefazolin  质量规格:>99%,BR
    调料总乳酸比色法定量检测试剂盒20 头孢唑啉(标准品)  Cefazolin  质量规格:>99%,标准品
    同酸待测样品处理试剂盒20 文多灵(标准品)  Vindoline  质量规格:HPLC98%,标准品
    6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA检测试剂盒Rabbit6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1a 96T/48T 茶碱(标准品)  Theophylline  质量规格:HPLC98%,标准品
    8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA检测试剂盒Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2α 96T/48T 苯甲酰新乌头原碱(标准品)  Benzoylmesaconine  质量规格:HPLC98%,标准品
    Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA检测试剂盒RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAX 96T/48T 葫芦巴碱(标准品)  Trigonelline  质量规格:HPLC98%,标准品
    p53(p53)ELISA检测试剂盒Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53 96T/48T 琥珀酸;丁二酸  Succinic acid  质量规格:AR,>99%
     

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