Rosetta(DE3) 感受态细胞100ul*10

Rosetta(DE3) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述：

产品名称	包装	分类
Rosetta(DE3) 感受态细胞100ul*10	100ul*10	表达感受态细胞

Rosetta(DE3) 感受态细胞100ul*10操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
长尾绿猴肾细胞;4647氧化镧(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide质量规格：>99%,EP
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氯化镁六水(分子生物学)Magnesium chloride, hexahydrate质量规格：>99%,分子生物学级
CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2醋酸锰四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate质量规格：>98%,BC
LX-2, 人肝星形细胞株 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)，GT1.1细胞 OK(负鼠(opossum)肾细胞)神经氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens质量规格：≥10 units/ mg
人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]乙酸镍四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate质量规格：>98%,BC
人骨肉瘤细胞;HOS苯扎氯铵（标准品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride质量规格：供HPLC法检查用和容量法含量测定用
人成纤维细胞(HMF)(5×105)苯扎氯铵（标准品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride质量规格：含量测定用
CM-H112人脂肪细胞完全培养基100mL甲硫酸新斯的明(标准品)Neostigmine methyl sulfate质量规格：HPLC>99%,标准品
小鼠浆细胞瘤;MPC-11 小鼠直肠平滑肌细胞完全培养基 100mL甘草酸二钾（标准品）Dipotassium glycyrrhizinate质量规格：含量测定
rEPC，大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus尼美舒利（标准品）Nimesulide质量规格：含量测定
盐酸哌唑嗪  Prazosin HCl  质量规格：>99%,BR 大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)免疫试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT
醋酸泼尼松龙  Prednisolone acetate  质量规格：>97%,USP,BR 大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)免疫试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit
醋酸泼尼松  Prednisone Acetate  质量规格：>98%,BR 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)免疫试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit
醋酸泼尼松（标准品）  Prednisone Acetate  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)免疫试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit
普瑞巴林  Pregabalin  质量规格：>99%,S构型 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)免疫试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit
盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼  Procarbazine HCl  质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养  大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)免疫试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit
盐酸丙卡巴肼(标准品)  Procarbazine HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)免疫试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit
盐酸丙卡特罗  Procaterol HCl  质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物 大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T
丙泊酚  Propofol  质量规格：>98.0%,熔点18 大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T
盐酸雷洛昔芬  Raloxifene HCl  质量规格：>98.5%,BR 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA检测试剂盒RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T
Rosetta(DE3) 感受态细胞100ul*10大鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)免疫试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA KIT 吡喹酮（标准品）  Praziquantel  质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)免疫试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT 盐酸哌唑嗪  Prazosin HCl  质量规格：>99%,BR
大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)免疫试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit 醋酸泼尼松龙  Prednisolone acetate  质量规格：>97%,USP,BR
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)免疫试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit 醋酸泼尼松  Prednisone Acetate  质量规格：>98%,BR
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)免疫试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit 醋酸泼尼松（标准品）  Prednisone Acetate  质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)免疫试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit 普瑞巴林  Pregabalin  质量规格：>99%,S构型
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)免疫试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit 盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼  Procarbazine HCl  质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养
大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)免疫试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit 盐酸丙卡巴肼(标准品)  Procarbazine HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMP 96T/48T 盐酸丙卡特罗  Procaterol HCl  质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物
大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsA 96T/48T 丙泊酚  Propofol  质量规格：>98.0%,熔点18