相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 英文名:
ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*50
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受态细胞100ul*50操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
HFDPC-c 人类的毛细胞(HFDPC) 500,000cells 膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)铱标准溶液(1000μg/ml,基质:2.0mol/L盐酸)Iridium standard solution质量规格:1000μg/ml,基质:2.0mol/L盐酸
支气管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)镍标准溶液(500mg/L,溶剂:1%硝酸)Nickel standard质量规格:500mg/L,溶剂:1%硝酸
IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 钾标准溶液(100µg/mL,基体:1%HCl)Potassium standard质量规格:100µg/mL,基体:1%HCl
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA镨标准溶液(1000µg/mL,基体:10%HCl)Praseodymium standard质量规格:1000µg/mL,基体:10%HCl
中国仓鼠卵巢细胞-二氢叶酸还原酶缺陷型;CHO/dhFr- 喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞 SF-9细胞,昆虫细胞系钨标准溶液(1000μg/ml,基体:0.1mol/LNaOH)Tungsten solution质量规格:1000μg/ml,基体:0.1mol/LNaOH
STO(小鼠胚成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL18RAP / IL1R7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 变色酸钠,铬变酸二钠Chromotropic acid disodium salt dihydrate质量规格:AR
人虹膜色素上皮细胞HIPEpiC溴百里酚蓝钠盐Bromothymol blue sodium salt质量规格:AR
EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人细胞裂解液 (阳性对照) 特地唑胺游离碱Tedizolid free base质量规格:>98%,BR
大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL特地唑胺;特地唑胺1酸酯Tedizolid phosphate;TR-701FA质量规格:>99%;BR
CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 灭活血清3-甲基-2-苯并噻唑酮腙盐酸盐,水合MBTH hydrochloride hydrate质量规格:>98%,BR
氧化石蒜碱 HPLC≥98% 20mg Humanβ-glucosidaseELISA试剂盒人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氧化小檗碱 HPLC≥98% 20mg Humanβ-glucuronidase,βGDELISA试剂盒人β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氧化型谷胱甘肽 HPLC≥98% 20mg Humanβ-hexosaminidaseAELISAKit 人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
药根碱 HPLC≥98% 20mg Humanβ-lactamaseELISA试剂盒人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒规格:96T/48T
野百合碱 HPLC≥99% 20mg Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
野黄芩苷 HPLC≥98% 20mg Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
野黄芩素 HPLC≥98% 20mg Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA试剂盒人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
野鹫尾苷 HPLC≥98% 20mg HumanβLactoglobulin,β-LgELISA试剂盒人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA试剂盒规格:96T/48T
野菊花内酯 HPLC≥98% 10mg Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
野马追内酯A HPLC≥95% 20mg Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISA试剂盒人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受态细胞100ul*50Humanβ-glucosidaseELISA试剂盒人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氧化石蒜碱 HPLC≥98% 20mg
Humanβ-glucuronidase,βGDELISA试剂盒人β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氧化小檗碱 HPLC≥98% 20mg
Humanβ-hexosaminidaseA 人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 氧化型谷胱甘肽 HPLC≥98% 20mg
Humanβ-lactamaseELISA试剂盒人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒规格:96T/48T 药根碱 HPLC≥98% 20mg
Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLI 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 野百合碱 HPLC≥99% 20mg
Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLI人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格:96T/48T 野黄芩苷 HPLC≥98% 20mg
Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA试剂盒人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格:96T/48T 野黄芩素 HPLC≥98% 20mg
HumanβLactoglobulin,β-LgELISA试剂盒人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA试剂盒规格:96T/48T 野鹫尾苷 HPLC≥98% 20mg
Humanβ-lipoopichormone,β-LPH 人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 野菊花内酯 HPLC≥98% 10mg
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISA试剂盒人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 野马追内酯A HPLC≥95% 20mg
ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢? 知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核系统
“你给它们安排的生产任务”――因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢?知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21 系列 就是lon 和ompT 蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计。真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核
的。每一个宿主细胞都像一个微观的小工厂,按照细胞固有的程序完成“你给它们安排的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢? 知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21 系列就是lon 和ompT 蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










