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EHA105 电击感受态细胞50ul*10

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  • 进口、国产
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      EHA105 电击感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      50ul*10

    产品名称:EHA105 电击感受态细胞50ul*10
    规格:50ul*10
    分类:根癌农杆菌感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    产品细节图片1
    EHA105 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    EHA105 电击感受态细胞50ul*10注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    EHA105 电击感受态细胞50ul*10操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
    SLC3A2 Others Rat 大鼠 SLC3A2 / CD98 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸地芬尼多杂质(1化合物)(标准品)Alkene质量规格:供检查用

    原代内皮细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100mlN-甲基帕罗西汀(标准品)N-Methylparoxetine质量规格:供检查用
    HuT 78细胞,人T细胞白血病细胞 小鼠浆细胞瘤,MPC-11细胞 上皮细胞培养基MEpiCM-prf七氟烷(标准品)Sevoflurane质量规格:供GC法检查用
    NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞) 5×106cells/瓶×2二甲氧苄啶(标准品)Diaveridine质量规格:检查
    BIU-87(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M030小鼠肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1美雄诺龙(标准品)Mestanolone质量规格:供HPLC法系统适用性试验用
    CL Others Human CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人细胞裂解液 (阳性对照) 菝葜皂苷元(标准品)Sarsasapogenin质量规格:HPLC98%,标准品

    615小鼠癌瘤株;Ca759阿魏酸钠Sodium ferulic质量规格:>99%
    L-02细胞,正常人肝细胞 APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株,7WML6.0细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA阿魏酸钠(标准品)Sodium ferulic质量规格:HPLC>99%(干品),标准品
    LLC(小鼠肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2头孢妥仑匹酯Cefditoren pivoxil质量规格:>950μg/mg,BR
    Promocell C-77110 Mitsuhashi/Maramorosh InsectMedium昆虫细胞培养基 500ml头孢妥仑匹酯(标准品)Cefditoren pivoxil质量规格:效价测定
    香叶木素(标准品)  Diosmetin  质量规格:HPLC98%,标准品 大鼠胰岛素受体底物2(IRS2)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate 2,IRS2 ELISA Kit

    金雀花碱,野靛碱  Cytisine  质量规格:≥98%,BR 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
    金雀花碱,野靛碱(标准品)  Cytisine  质量规格:HPLC98%,标准品 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
    厄贝沙坦  Irbesartan  质量规格:>99%,BR,Angiotensin II受体抑制剂 大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)免疫试剂盒 Rat Insulin-like Growth Factors 1 Receptor,IGF-1R ELISA Kit
    5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基甲基)-胸苷-3'-O-丁二酸  5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid  质量规格:BR,原装进口 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit 96T/48T
    水杨苷  D-(−)-Salicin  质量规格:≥98%,BR 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit
    水杨苷(标准品)  D-(−)-Salicin  质量规格:HPLC98%,标准品 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
    厚朴酚  Magnolol  质量规格:≥98%,BR 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit
    厚朴酚(标准品)  Magnolol  质量规格:HPLC98%,标准品 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit
    埃索美拉唑镁(三水)  Esomeprazole magnesium trihydrate  质量规格:>99%,BR 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA kit
    EHA105 电击感受态细胞50ul*10大鼠胰岛素受体底物1(IRS-1)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate-1,IRS-1 ELISA Kit 香叶木素  Diosmetin  质量规格:≥98%,BR

    大鼠胰岛素受体底物2(IRS2)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate 2,IRS2 ELISA Kit 香叶木素(标准品)  Diosmetin  质量规格:HPLC98%,标准品
    大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1 96T/48T 金雀花碱,野靛碱  Cytisine  质量规格:≥98%,BR
    大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 金雀花碱,野靛碱(标准品)  Cytisine  质量规格:HPLC98%,标准品
    大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)免疫试剂盒 Rat Insulin-like Growth Factors 1 Receptor,IGF-1R ELISA Kit 厄贝沙坦  Irbesartan  质量规格:>99%,BR,Angiotensin II受体抑制剂
    大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2 96T/48T 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基甲基)-胸苷-3'-O-丁二酸  5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid  质量规格:BR,原装进口
    大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 水杨苷  D-(−)-Salicin  质量规格:≥98%,BR
    大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 水杨苷(标准品)  D-(−)-Salicin  质量规格:HPLC98%,标准品
    大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit 厚朴酚  Magnolol  质量规格:≥98%,BR
    大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit 厚朴酚(标准品)  Magnolol  质量规格:HPLC98%,标准品
     

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