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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
EHA105 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*10
规格:50ul*10
分类:根癌农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
EHA105 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
EHA105 电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
EHA105 电击感受态细胞50ul*10操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
SLC3A2 Others Rat 大鼠 SLC3A2 / CD98 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸地芬尼多杂质(1化合物)(标准品)Alkene质量规格:供检查用
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LLC(小鼠肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2头孢妥仑匹酯Cefditoren pivoxil质量规格:>950μg/mg,BR
Promocell C-77110 Mitsuhashi/Maramorosh InsectMedium昆虫细胞培养基 500ml头孢妥仑匹酯(标准品)Cefditoren pivoxil质量规格:效价测定
香叶木素(标准品) Diosmetin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠胰岛素受体底物2(IRS2)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate 2,IRS2 ELISA Kit
金雀花碱,野靛碱 Cytisine 质量规格:≥98%,BR 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
金雀花碱,野靛碱(标准品) Cytisine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
厄贝沙坦 Irbesartan 质量规格:>99%,BR,Angiotensin II受体抑制剂 大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)免疫试剂盒 Rat Insulin-like Growth Factors 1 Receptor,IGF-1R ELISA Kit
5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基甲基)-胸苷-3'-O-丁二酸 5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid 质量规格:BR,原装进口 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit 96T/48T
水杨苷 D-(−)-Salicin 质量规格:≥98%,BR 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit
水杨苷(标准品) D-(−)-Salicin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
厚朴酚 Magnolol 质量规格:≥98%,BR 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit
厚朴酚(标准品) Magnolol 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit
埃索美拉唑镁(三水) Esomeprazole magnesium trihydrate 质量规格:>99%,BR 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA kit
EHA105 电击感受态细胞50ul*10大鼠胰岛素受体底物1(IRS-1)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate-1,IRS-1 ELISA Kit 香叶木素 Diosmetin 质量规格:≥98%,BR
大鼠胰岛素受体底物2(IRS2)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate 2,IRS2 ELISA Kit 香叶木素(标准品) Diosmetin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1 96T/48T 金雀花碱,野靛碱 Cytisine 质量规格:≥98%,BR
大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 金雀花碱,野靛碱(标准品) Cytisine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)免疫试剂盒 Rat Insulin-like Growth Factors 1 Receptor,IGF-1R ELISA Kit 厄贝沙坦 Irbesartan 质量规格:>99%,BR,Angiotensin II受体抑制剂
大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2 96T/48T 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基甲基)-胸苷-3'-O-丁二酸 5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid 质量规格:BR,原装进口
大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 水杨苷 D-(−)-Salicin 质量规格:≥98%,BR
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 水杨苷(标准品) D-(−)-Salicin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit 厚朴酚 Magnolol 质量规格:≥98%,BR
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit 厚朴酚(标准品) Magnolol 质量规格:HPLC≥98%,标准品
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