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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
49
- 英文名：
BJ5183-AD-1 电击感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50ul*50
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| BJ5183-AD-1 电击感受态细胞50ul*50 | 50ul*50 | 克隆感受态细胞 |
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解液 (阳性对照) 抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂)Aprotinin质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2E-64,蛋白酶抑制剂E64质量规格：>98%,BR
IL1R2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿齐沙坦酯Azilsartan Medoxomil质量规格：>98%,BR
滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)α-淀粉酶α-Amylase质量规格：BR，4000u/g
T2细胞，转HLA-2基因B细胞 小鼠癌细胞,MA891细胞 人神经元cDNAHN cDNAα-糜蛋白酶Chymotrypsin质量规格：1500USP u/mg,猪源
SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1 人膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL雌二醇,β-雌二醇Estradiol质量规格：>98.0%,BR,可用于细胞培养
人角膜上皮细胞RNAHCEpiC miRNA5 μg雌二醇,β-雌二醇（标准品）Estradiol质量规格：HPLC>98%,标准品
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) 雌三醇Estriol质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3雌三醇(标准品)Estriol质量规格：HPLC>97%,标准品
SW116细胞，人大肠癌细胞 人葡萄膜色素细胞,UM细胞 人结直肠腺癌细胞;Caco-2*泊甙(进分)Etoposide质量规格：>98%,进分,sigma E1383
异木香酸 HPLC≥98% 5mg Rat calf iestine alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 大鼠牛小肠碱性0酸酶(CIAP)ELISA试剂盒
异石当归素 HPLC≥98% 5mg Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒
异柿醌 HPLC≥98% 5mg Rat caspase 3 (Casp-3) ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒
异栓翅芹醇 HPLC≥98% 5mg Rat caspase 9 (Casp-9) ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒
异水菖蒲二醇 HPLC≥98% 5mg Rat catecholamine (CA) ELISA Kit 大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒
异藤黄氧蒽酮 E HPLC≥98% 5mg Rat cholecystokinin / cholecystokinin (CCK) ELISA Kit 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒
异野葛素 HPLC≥98% 5mg Rat cholesterol ester ansfer protein (CETP) ELISA Kit 大鼠胆酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
异野漆树苷 HPLC≥98% 5mg Rat ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒
淫羊藿甙E HPLC≥98% 5mg Rat Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒
银线草醇 C HPLC≥98% 5mg Rat coagulation factor II (F II) ELISA Kit 大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒
BJ5183-AD-1 电击感受态细胞50ul*50Rat calcium binding protein (CR) ELISA Kit 大鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒 异美迪紫檀素 HPLC≥98% 5mg
Rat calf iestine alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 大鼠牛小肠碱性0酸酶(CIAP)ELISA试剂盒 异木香酸 HPLC≥98% 5mg
Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒 异石当归素 HPLC≥98% 5mg
Rat caspase 3 (Casp-3) ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 异柿醌 HPLC≥98% 5mg
Rat caspase 9 (Casp-9) ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 异栓翅芹醇 HPLC≥98% 5mg
Rat catecholamine (CA) ELISA Kit 大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 异水菖蒲二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat cholecystokinin / cholecystokinin (CCK) ELISA Kit 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒 异藤黄氧蒽酮 E HPLC≥98% 5mg
Rat cholesterol ester ansfer protein (CETP) ELISA Kit 大鼠胆酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 异野葛素 HPLC≥98% 5mg
Rat ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒 异野漆树苷 HPLC≥98% 5mg
Rat Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒 淫羊藿甙E HPLC≥98% 5mg
BJ5183-AD-1 电击感受态细胞50ul*50操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
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文献和实验Generation of Recombinant Adenovirus Using the Escherichia coli BJ5183 Recombination System
here uses homologous recombination machinery of Escherichia coli BJ5183 to construct plasmids used in generation of adenoviral vectors. With this method, no ligation steps are involved in generating the plasmids, and any region of the adenoviral genome
Construction and Characterization of Adenovirus Vectors
2006 ). Suspend the DNA in a total volume of 25 µL of 0.1X TE-Ad. 12. Repeat Steps 5-10 with 5 µL of DNA (from Step 11) and 100 µL of DH5 cells, rather than BJ5183. 13. Select two colonies from each plate. Purify the DNA
（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
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