EPI400 感受态细胞100ul*10

产品名称：EPI400 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

EPI400 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
EPI400 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
EPI400 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr异佛手柑内酯Isobergapten质量规格：HPLC≥98%，标准品
RGMA Others Human 人 RGMA 人细胞裂解液 (阳性对照) 异甘草苷（标准品）Isoliquiritin质量规格：HPLC≥98%，标准品
A375 人恶性色素瘤细胞雷马曲班Ramatroban;BAY u3405质量规格：>98%,BR
C6-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)大鼠脑胶质瘤细胞 C6-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml puromycin异钩藤碱(标准品)Isorhynchophylline质量规格：HPLC≥98%，标准品
RSPO2 Protein Human 重组人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 标签)异荭草苷(标准品)luteolin-6-C-glucoside质量规格：HPLC≥98%，标准品
人间充质干细胞-肝脏裂解物HMSC-hp L超细高岭土(6000(3.5um))Kaolin(superfine)质量规格：6000(3.5um)
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人细胞裂解液 (阳性对照) 高岭土(医药级)Kaolin质量规格：医药级
正常小鼠Leydig细胞;TM3硅藻土G(TLC专用)Kieselguhr G质量规格：TLC专用
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2 III型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL硅胶(AR)Silica gel质量规格：AR
EC109，人食管癌细胞 Human二氧化硅(99.99%,1-3mm)Silicon dioxide质量规格：99.99%,1-3mm
乙酰紫堇灵（标准品）  Acetylcorynoline  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原交联(PYD)ELISA试剂盒 ，英文名： PYD ELISA Kit
异阿魏酸（标准品）  3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
异补骨脂查尔酮;补骨脂乙素  Isobavachalcone  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒 ，英文名： Collagenase I ELISA Kit
异补骨脂二氢黄酮（标准品）  Isobavachin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MouseCollagenaseIELISAKit 96T/48T
异补骨脂素(标准品)  Angelicin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒 ，英文名： Collagenase II ELISA Kit
异佛手柑内酯  Isobergapten  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒MouseCollagenaseTypeIIELISAKit 96T/48T
异甘草苷（标准品）  Isoliquiritin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA检测试剂盒Mouseglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKIT 96T/48T
雷马曲班  Ramatroban;BAY u3405  质量规格：>98%,BR 小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 ，英文名： GDNF ELISA Kit
异钩藤碱(标准品)  Isorhynchophylline  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 ，英文名： GDNF ELISA Kit
异荭草苷(标准品)  luteolin-6-C-glucoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠角蛋白18(K18)ELISA试剂盒 ，英文名： K18 ELISA Kit
EPI400 感受态细胞100ul*10小鼠降钙素原(PCT)ELISA检测试剂盒MouseProcalcitonin,PCT 96T/48T 野黄芩苷(标准品）  Scutellarin  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠降钙素原(PCT)ELISA试剂盒 ，英文名： PCT ELISA Kit 野黄芩素(标准品)  Scutellarein  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠交联物(PY)ELISA试剂盒 ，英文名： PY ELISA Kit 8-O-乙酰山栀苷甲酯（标准品）  8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶原交联(PYD)ELISA试剂盒 ，英文名： PYD ELISA Kit 乙酰紫堇灵（标准品）  Acetylcorynoline  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 异阿魏酸（标准品）  3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒 ，英文名： Collagenase I ELISA Kit 异补骨脂查尔酮;补骨脂乙素  Isobavachalcone  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MouseCollagenaseI 96T/48T 异补骨脂二氢黄酮（标准品）  Isobavachin  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒 ，英文名： Collagenase II ELISA Kit 异补骨脂素(标准品)  Angelicin  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒MouseCollagenaseTypeII 96T/48T 异佛手柑内酯  Isobergapten  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA检测试剂盒Mouseglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNF 96T/48T 异甘草苷（标准品）  Isoliquiritin  质量规格：HPLC≥98%，标准品