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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
53
- 英文名：
DB3.1 电击感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50ul*5
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：DB3.1 电击感受态细胞50ul*5
规格：50ul*5
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签)原薯蓣皂苷(标准品)Protodioscin质量规格：HPLC≥98%，标准品
PATU8988(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 视网膜muller细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)原苏木素B/原巴西苏木素（标准品）Protosappanin B质量规格：HPLC≥98%，标准品
周细胞生长添加物PGS远志酸（标准品）Polygalacic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品
SRPK3 Others Human 人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 远志皂苷元(标准品)Senegenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904月桂1（香叶1）Myrcene质量规格：HPLC≥80%，标准品
Hs 746T(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2单1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate质量规格：>98%,BR
Gibco 17100017 Collagenase Type I 1gα-萘黄酮α-Naphthoflavone质量规格：>98%, 进口
人晶状体上皮细胞裂解物HLEpiCL紫脲酸铵Murexide质量规格：ACS
ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸羟胺Hydroxylammonium chloride质量规格：AR
小鼠色素瘤细胞;B163,3'-二甲基联萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine质量规格：>97%,进分
原人参三醇 HPLC≥98% 20mg MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原薯蓣皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA试剂盒小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原苏木素B HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原伪金丝桃素 HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA试剂盒小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远华蟾蜍精 HPLC≥98% 20mg Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA试剂盒小鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志山酮III HPLC≥98% 20mg Mouseadrenomedullin,ADMELISA试剂盒小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志酸 HPLC≥98% 20mg Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA试剂盒小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志糖苷C HPLC≥98% 20mg MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志皂苷B HPLC≥98% 5mg MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISA试剂盒小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志皂苷D HPLC≥98% 20mg Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原人参三醇 HPLC≥98% 20mg
MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA试剂盒小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原薯蓣皂苷 HPLC≥98% 20mg
mouseadrencocoicoopichormone,ACTH小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原苏木素B HPLC≥98% 20mg
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA试剂盒小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原伪金丝桃素 HPLC≥98% 20mg
Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA试剂盒小鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远华蟾蜍精 HPLC≥98% 20mg
Mouseadrenomedullin,ADMELISA试剂盒小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志山酮III HPLC≥98% 20mg
Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA试剂盒小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志酸 HPLC≥98% 20mg
MouseAialNaiureticPeptide,ANP小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志糖苷C HPLC≥98% 20mg
MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISA试剂盒小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志皂苷B HPLC≥98% 5mg
Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgA小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志皂苷D HPLC≥98% 20mg
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5操作说明：
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：DB3.1 电击感受态细胞50ul*5
规格：50ul*5
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签)原薯蓣皂苷(标准品)Protodioscin质量规格：HPLC≥98%，标准品
PATU8988(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 视网膜muller细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)原苏木素B/原巴西苏木素（标准品）Protosappanin B质量规格：HPLC≥98%，标准品
周细胞生长添加物PGS远志酸（标准品）Polygalacic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品
SRPK3 Others Human 人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 远志皂苷元(标准品)Senegenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904月桂1（香叶1）Myrcene质量规格：HPLC≥80%，标准品
Hs 746T(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2单1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate质量规格：>98%,BR
Gibco 17100017 Collagenase Type I 1gα-萘黄酮α-Naphthoflavone质量规格：>98%, 进口
人晶状体上皮细胞裂解物HLEpiCL紫脲酸铵Murexide质量规格：ACS
ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸羟胺Hydroxylammonium chloride质量规格：AR
小鼠色素瘤细胞;B163,3'-二甲基联萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine质量规格：>97%,进分
原人参三醇 HPLC≥98% 20mg MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原薯蓣皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA试剂盒小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原苏木素B HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原伪金丝桃素 HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA试剂盒小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远华蟾蜍精 HPLC≥98% 20mg Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA试剂盒小鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志山酮III HPLC≥98% 20mg Mouseadrenomedullin,ADMELISA试剂盒小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志酸 HPLC≥98% 20mg Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA试剂盒小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志糖苷C HPLC≥98% 20mg MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志皂苷B HPLC≥98% 5mg MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISA试剂盒小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
远志皂苷D HPLC≥98% 20mg Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原人参三醇 HPLC≥98% 20mg
MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA试剂盒小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原薯蓣皂苷 HPLC≥98% 20mg
mouseadrencocoicoopichormone,ACTH小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原苏木素B HPLC≥98% 20mg
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA试剂盒小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 原伪金丝桃素 HPLC≥98% 20mg
Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA试剂盒小鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远华蟾蜍精 HPLC≥98% 20mg
Mouseadrenomedullin,ADMELISA试剂盒小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志山酮III HPLC≥98% 20mg
Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA试剂盒小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志酸 HPLC≥98% 20mg
MouseAialNaiureticPeptide,ANP小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志糖苷C HPLC≥98% 20mg
MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISA试剂盒小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志皂苷B HPLC≥98% 5mg
Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgA小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 远志皂苷D HPLC≥98% 20mg
DB3.1 电击感受态细胞50ul*5操作说明：
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
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