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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
BY4741 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*10
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
产品名称:BY4741 感受态细胞100ul*10
规格:100ul*10
分类:酵母感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
BY4741 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
Eca-109细胞,人食管癌细胞 人脑瘤细胞,SF126细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF 17无蛋白酶牛血清白蛋白Albumin, from bovine Protease free质量规格:>98%,分子生物学级
CA46(人Butts淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2硬脂酸铝Aluminum stearate质量规格:AR
CD84 Others Human 人 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) 铋试剂III(>99%,BR)Bismuth(III) nitrate pentahydrate质量规格:>99%,BR
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B41酸氢钙二水(>98%,BR)Calcium phosphate, dibasic, dihydrate质量规格:>98%,BR
CSF3R Others Human 人 G-CSFR / CD114 人细胞裂解液 (阳性对照) 碳酸铈Cerium(III) carbonate, hydrate质量规格:>99.9%,AR
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1 腺癌细胞,SK-BR-3细胞 RK-13细胞,兔肾细胞系DL-胱氨酸DL-Cystine质量规格:0.98
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 HumanN-氧基曲唑酮Trazodone N-Oxide质量规格:美国进口
CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-羟基盐酸曲唑酮4'-Hydroxy Trazodone HCl质量规格:美国进口
人表皮角质细胞-裂解物HEK-a L盐酸伐伦克林标记15N3Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3质量规格:美国进口
HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 内酰胺伐伦克林Varenicline Lactam质量规格:美国进口
天麻素 Gastrodin 质量规格:HPLC≥98%,BR 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-1 ELISA Kit
甜菊苷(标准品) Stevioside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T
土贝母苷甲(标准品) Tubeimoside I 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-2 ELISA Kit
土荆皮乙酸(标准品) Pseudolaric Acid B 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAkit 96T/48T
土木香内酯(标准品) Alantolactone 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-3 ELISA Kit
蜕皮激素(标准品) Ecdysterone 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAkit 96T/48T
脱水穿心莲内酯(标准品) Dehydroandrographolide 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-4 ELISA Kit
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯(标准品) Dehydroandrographolide succinate 质量规格:HPLC≥99%,标准品 小鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)ELISA试剂盒 ,英文名: SDF1 ELISA Kit
脱水淫羊藿素(标准品) Anhydroicaritin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA检测试剂盒MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 96T/48T
脱氧野尻霉素(标准品) 1-Deoxynojirimycin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 ,英文名: SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit
BY4741 感受态细胞100ul*10小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA试剂盒 ,英文名: MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit 梭砂贝母碱(标准品) Hupehenine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA检测试剂盒Mousemaixmetalloproteinase9//GelatinaseB,MMP-9 96T/48T 特女贞苷(标准品) Specnuezhenide 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1 96T/48T 天麻素(标准品) Gastrodin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-1 ELISA Kit 天麻素 Gastrodin 质量规格:HPLC≥98%,BR
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2 96T/48T 甜菊苷(标准品) Stevioside 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-2 ELISA Kit 土贝母苷甲(标准品) Tubeimoside I 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3 96T/48T 土荆皮乙酸(标准品) Pseudolaric Acid B 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-3 ELISA Kit 土木香内酯(标准品) Alantolactone 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4 96T/48T 蜕皮激素(标准品) Ecdysterone 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-4 ELISA Kit 脱水穿心莲内酯(标准品) Dehydroandrographolide 质量规格:HPLC≥98%,标准品
BY4741 感受态细胞100ul*10操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
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文献和实验Freezedown Guidelines What to Save For each 96-pack, each lab will have yeast representatives from all four strains: BY4741 (or BY4730), BY4742 (or BY4739), BY4743, and the homozygous diploid. It is recognized
4561 gttttgctct ccgtttgata taagtttggg caatgggaag cagtacacag taaccaggta 4621 atgatcactc tttagccttt taacaccctg tttactgaac aaaaacggtt ccgttgaccg 4681 aatcagctgg caagcaaagc agggcaggag gagaggcggc ctgcagctcc agatgcacat 4741 ggcttgggtc tggcttcaag ctctggtcac
aggtgactgt gcttgtcggg acccccaggc ccaagaacac 4621 agccggaaag acctccgggg atacagccat ggctaaggaa ggacaagaag ttgtcaaaga 4681 attcccaacg ccaggaccca catccctttg gtattgattt cacagtcagc tgctcaacgg 4741 aatggcctct ccacaccagg gatccttagc acccaaccgg tctgccttta attttaccca
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