- ￥360 - 795
- GeneCopoeia
- QP056/QP057
- 中国
- 2025年07月15日
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有
- 英文名：
SureScript™ First-Strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期：
12个月
- 供应商：
GeneCopoeia
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
20次RT反应/60次RT反应
SureScript™ First-Strand cDNA Synthesis Kit是根据可靠实验设计并研发的通用性cDNA第一链合成试剂盒，适用于大多数来源的RNA。
- 简便有效
- 效能可靠
- 性价比高
SureScript™ First-Strand cDNA Synthesis Kit包含逆转录酶和一整套特殊试剂组合，其cDNA产物适用于基因克隆、cDNA文库构建，以及定量PCR扩增。
本产品使用的是经基因工程改造的逆转录酶，通过降低其RNase H 活性并增加其热稳定性，使得该酶可以在比传统M-MLV RTase 更高的温度下合成第一链cDNA，从而提供更高特异性和产量的cDNA。这个应用过程中，RNase活性的缺失非常重要，因为这种活性在合成长cDNA必须的长时间温育过程中会使模板降解。这种活性的缺失，可用于生产长链cDNA和构建含高比例全长cDNA的文库。
SureScript™ First-Strand cDNA Synthesis Kit可与BlazeTaq™ SYBR Green qPCR Master Mix 2.0结合使用，作为two-step RT-qPCR的第一步，将mRNA转化为cDNA；cDNA随后可用于qPCR分析。
图1：使用BlazeTaq™ two-step RT-qPCR体系扩增β-actin。10倍梯度稀释HeLa细胞RNA提取物用SureScript™ First-Strand cDNA Synthesis Kit逆转录成cDNA，使用BlazeTaq™ SYBR Green qPCR Mix 2.0扩增β-actin，总量的范围为100 ng至1 pg。
图2： BlazeTaq™ two-step RT-qPCR体系（红色）与Competitor A（A）和Competitor B（B）试剂盒（蓝色）产品的性能对比。对HeLa细胞RNA提取物中B2M水平进行分析，RNA提取物以10倍梯度稀释成6个样本，总量的范围为100 ng至1 pg。
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文献和实验
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- Shule Zhang, et al. 2024.Extracellular vesicles derived from HuMSCs alleviate daunorubicin-induced cardiac microvascular injury via miR-186-5p/PARP9/STAT1 signal pathway. Regen Ther.DOI:10.1016/j.reth.2024.01.011[SureScript™ First-Strand cDNA Synthesis Kit, Cat. No.QP056; BlazeTaq™ One-Step SYBR™ Green RT-qPCR Kit, Cat. No.QP081]
- Qian-Yun Li, et al. 2024.Overexpression of MTFR1 promotes cancer progression and drug-resistance on cisplatin and is related to the immune microenvironment in lung adenocarcinoma. Aging (Albany NY).DOI:10.18632/aging.205338[SureScript™ First-Strand cDNA synthesis kit; BlazeTaq™ SYBR Green qPCR Mix 2.0]
M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
通过体外无细胞系统翻译找出目的基因mRNA以后，变可进行cDNA第一链的合成，其步骤包括： 1）在Ependorf管中加50pmol/L的一种α32PdNTP和1mg/ml的mRNA 10μl（10μg），100m mol/L甲基氢氧化汞1μl，室温反应l0分钟，使RNA变性。 2)加100m mol/L的β-巯基乙醇2μl和10m mol/L RNA酶抑制剂2μl，室温放置5分钟。β-巯基乙醇有稳定逆转录酶活性的作用。 3)向上述反应混合物加lmg／ml
相关专题 问：SMARTTM cDNA 技术的原理是什么？ 答： SMARTTM cDNA 合成技术利用总RNA 或者Poly A+ RNA 作为模板，以一种改造的oligo(dT)寡苷酸作为引物，在MMLV 反转录酶催化作用下合成第一链。当反转录酶到达mRNA 的5"末端时，反转录酶的末端转移酶活性会在第一链 cDNA 的3"端加上3-5 个脱氧胞苷酸。SMART寡苷酸的3"端含有一段延长的鸟苷酸残基，与富集的胞苷酸退火形成
