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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
TIANScript Ⅱ RT Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
天根生化科技（北京）有限公司
- 规格：
20μl×25次/20μl×100次
| 规格： | 20μl×25次 | 产品价格： | ￥560.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 20μl×100次 | 产品价格： | ￥1860.0 |
■ 底物范围广： 适用于所有 RNA， 尤其是具有复杂二级结构的 RNA 模板。
■ 反转片段长：cDNA 第一链合成可以达到 12 kb。
TIANScript Ⅱ cDNA 第一链合成试剂盒不同长度片段的反转录能力
实验材料：人类贴壁细胞总RNA。
RT-PCR 起始量：2 μl 反转录产物（50 ng/μl)
实验方法：反转录：参照KR107 说明书进行操作。
实验结果：以上为1 μg 总RNA 反转录后取2 μl 反转录产物进行
10 个长度不同的目标基因的扩增图。
扩增体系(PCR): 20 μl；上样量：5 μl；
Marker：D15000+1kb DNA Ladder；胶浓度：1%；
电泳条件：6 V/cm，20 min
各泳道图示：M：DNA Marker； 1：产物长度120 bp；
2：产物长度：1 kb； 3：产物长度：2.5 kb；
4：产物长度：3.2 kb； 5：产物长度：4.6 kb；
6：产物长度：6.8 kb； 7：产物长度：7.6 kb；
8：产物长度：8.9 kb； 9：产物长度：10 kb；
10：产物长度：12 kb。 
TIANScript Ⅱ cDNA 第一链合成试剂盒与其他公司产品在长片段模板反转录过程中，效率和特异性的对比
实验材料：人类贴壁细胞总RNA。
RT-PCR 起始量：2 μl 反转录产物（50 ng/μl)
实验方法：反转录：参照KR107 说明书进行操作。
实验结果：以上为1 μg 人类贴壁细胞总RNA 为模板，同时使用某进口
品牌M-MLV 和TIANScript II RT Kit 反转录后进行6 个长度不同的目标基因的扩增对比图。
扩增体系(PCR): 20 μl；上样量：5 μl；
Marker：DNA MarkerIII; 胶浓度：1%；
电泳条件：6 V/cm，20 min。
各泳道图示：M: DNA Marker；1：TIANScriptII RT Kit 反转录cDNA 的扩增结果；2：进口同类产品反转录cDNA的扩增结果；基因1产物长度1.3kb；基因2 产物长度3.0 kb；基因3 产物长度5.0 kb；基因4 产物长度7.5 kb；
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
NaOH， 1mmol/L EDTA。 (4) 将胶浸入7% TCA中，室温放置30分钟(直至染料由蓝色变至黄色)，取出置滤纸上，干燥数小时。 (5) 用保鲜膜包裹干燥的胶，室温压X光片(用增感屏时-70℃压片)。 二、其它cDNA合成技术 除Riboclone M-MLV(H-)cDNA合成技术外，Promega公司还提供有多个AMV合成试剂盒，不同试剂盒所提供的引物或引物一延接头(Primpr-Adaptor)不同，有oligo(dT)15 引物、随机引物、XbaⅠ引物-延
,42℃放置2分钟; 6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II―RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶.二. cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega): 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd
