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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 英文名：
2×SYBR Green Color qPCR Mix
- 库存：
500
- 供应商：
EZBioscience
- 规格：
5ml（20ul×500Rxns）/25ml（20ul×2500Rxns）
| 规格： | 5ml（20ul×500Rxns） | 产品价格： | ￥1200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 25ml（20ul×2500Rxns） | 产品价格： | ￥5800.0 |
一、试剂盒简介
本试剂盒采用具有超强扩增能力和抗干扰能力的热启动 DNA聚合酶，结合其高度优化的缓冲液体系和染料系统，使之具备更强的扩增效率、抗干扰能力，更高的灵敏度和特异性。在相同情况下具有起峰更早、得到的荧光信号更强、Ct值更小及熔解曲线特异性更高等特点。
本试剂盒的 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix中含有高稳定性的红色染料，可与 EZBioscience® Color Reverse Transcription Kit (Cat. No.: A0010C, A0010CG或 A0010CGQ)一起使用，后者含有蓝色染料。在进行 qPCR加样时，彩色逆转录试剂盒逆转录生成的 cDNA（蓝色），与本试剂盒的 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix（红色）混合后，溶液会变成紫色。这在加样时提供了很好的视觉辅助，大大降低了加样错误的风险。因此，建议将这两种试剂盒配套使用以获得最佳效果。
二、产品组分
| Components | A0012 (500 Rxns × 20μl) | A0012-L (2500 Rxns × 20μl) |
| 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix*1 | 5 ml | 25 ml |
| 50× ROX Reference Dye 1*2 | 220 µl | 220 µl × 5 tubes |
| 50× ROX Reference Dye 2*2 | 220 µl | 220 µl × 5 tubes |
*1：包含hot-start DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+, SYBR Green Ⅰdye和red dye。
*2：用于校正不同孔之间产生的荧光信号误差。
三、试剂保存条件
所有组分建议置于-20℃避光保存。
四、适用的仪器型号
本试剂盒适用于所有的荧光定量PCR仪：
| 类别 | 预混ROX类型 | 对应仪器型号 |
| （a） | 预混ROX1 | ABI 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne™, StepOne Plus™， 5700, 7000, 7300, 7700 |
| （b） | 预混ROX2 | Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™; Roche LightCyclerTM 480; Roche LightCyclerTM 96; Cepheid SmartCycler®; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR; Thermo Scientific PikoReal Cycler; Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000; ABI 7500, 7500 Fast, Quanti-Studio 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™ |
五、注意事项
使用前，将 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix及 ROX试剂从-20°C冰箱中取出，室温放置 5 ~ 10分钟或用手紧握试剂管使之充分融化，上下颠倒10次充分混匀（非常重要），然后使用离心机短暂离心至管底，放在冰上备用。
六、关于 qPCR反应是否良好的判断
1、如果扩增曲线呈典型的 S型曲线，荧光背景信号阶段、荧光信号指数扩增阶段及平台期均完整可见，熔解曲线单峰，内参 Ct值在合理范围内（通常可在 13 ~ 22之间，典型的内参 Ct值在 15 ~ 20之间），则可认为该反应正常；
2、如果同一个模板和引物的重复孔的 Ct值相差 0.5以内；同时满足以上两个条件的可以认为数据可用。
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文献和实验真香！用 qPCR 做外泌体研究，南京医科大学拿下 41 分 SCI
qPCR 检测后进行功能评估。本研究对血浆外泌体 circLPAR1 可作为 CRC 高灵敏早期诊断标志物提供了新的证据。 qPCR 检测外泌体是强强联手还是无稽之谈？ 我们也许会有疑问：外泌体本来就少，提取的 RNA 就更少，后续做 qPCR 检测岂不是难上加难？想知道 qPCR 检测外泌体是否具有合理性，我们需要先了解如何进行这项实验。 实验过程： 1）外泌体提取 包括 Umibio 在内的很多公司都有针对各种不同样本的外泌体提取试剂盒。样本预处理阶段很重要，甚至决定了后续提取外泌体的纯度和量
qisanni05 请问 做一种microRNA逆转录用哪家公司的试剂盒性价比较高？谢谢您的帮助！ 大鹏鸟 不知道你要做啥？RT-PCR？ 国内挺多的，不过广州复能基因的貌似挺全、挺专业的。http://www.fulengen.com/product/reagent/qpcr_detect.php All-in-One First-Strand cDNA Synthesis Kit 采用
荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外，qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况： 1. 复孔间重复性差怎么办？ 复孔间重复性差一般会有以下两种情况： （1）CT 值很大，如 CT≥ 30，重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法：如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上，那 CT 值为准确的，可多设置
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