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- 百奥莱博
- BTN90208-QWM
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
285
- 英文名：
E.coli SURE Chemical Competent Cell
- 保质期：
半年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
0.1mL*10
特别提示：包括大肠杆菌SURE化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：大肠杆菌SURE化学感受态细胞
英文名称：E.coli SURE Chemical Competent Cell
产品货号：BTN90208
产品规格：0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌SURE菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株主要是用来克隆不稳定DNA结构如重复序列、二级结构(如Z-DNA)等。
菌株基因型：
| 基因型 | 表现型 |
| endA1 | 核酸内切酶I缺失 |
| gyr A96 | 具有萘啶酮酸抗性 |
| lac | 不能利用乳糖 |
| rec B & rec J | DNA重组修复功能缺失 |
| relA1 | 允许在无蛋白质合成时有RNA合成 |
| sbcC | 允许基本重组 |
| supE44 | 抑制琥珀突变，为某些噬菌体必需 |
| thi-1 | 需要硫氨才能生长 |
| umuC::Tn5 | 卡那霉素抗性 |
| uvr C | 不能切除变异碱基 |
| mcrA△(mcr CB-hsdSMR-mrr)171 | DNA甲基化系统缺失 |
| F’[ lacIlac Z△M15 Tn10 proAB+] | 提供α-互补所需的ω片断，具有四环素抗性 |
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等
使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
我公司销售的大肠杆菌SURE化学感受态细胞北京品牌，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞： 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株，常用 RM 符号表示。转化方法：电击
修饰。SURE感受态细胞针对uvrC,umuC,SbcC和RecJ等参与修饰的大肠杆菌基因或蛋白进行突变，提高了真核来源、不规则DNA的稳定性达20倍以上，并且适合克隆甲基化DNA。提供化学和电转化感受态细胞，效率分别达1x1010 和1x109 。ABLE® －克隆毒性 DNA 目的DNA的蛋白产物常常对细胞产生毒性，通常的解决办法是采用低拷贝质粒，或者采用极为严紧的表达调控。为了获得稳定的克隆，ABLE细胞减少ColE来源质粒的拷贝数（如pUC、pBluescript系列载体），以达到
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