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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
434
- 英文名:
Human Placenta cDNA
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻融
- 规格:
100μl(20次反应)
特别提示:包括人类cDNA在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:人类cDNA
英文名称:Human Placenta cDNA
产品货号:WE0227
产品规格:100μl(20次反应)
本产品是以人胎盘组织RNA为模板,Oligo(dT)以及Random为引物, 用百奥莱博的高灵敏度的逆转录酶反转录得到的PCR即用型cDNA,可用于PCR实验的阳性对照。纯度:OD260/280≈1.8
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl体系 | 终浓度 |
| 10×Taq PCR Buffer with Mg2+ | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,2.5 mM each | 4μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Human Placenta cDNA | 5μl | |
| Taq DNA Polymerase,2.5 U/μl | 0.5μl | |
| RNase-Free Water | 补水至50μl |
注意:
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)镁离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM镁离子,可根据丌同的引物对和模板来调节镁离子浓度,由此优化反应体系。
2、将混合好的液体进行PCR反应。
3、结果检测:反应结束后取5μl反应产物,加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
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5 min 结果:可见Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于原核或真核生物DNA均可高效。相较于同类的taq mix的扩增效率更高,且对于高GC含量也可得到很好的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳如图可见明亮条带。 三、 cDNA扩增 人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA扩增1.2 kbp片段 模板:人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA 200 ng/50 μL Primer: PrimerF
【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费?
个和12,000个,其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供:一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签,一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上,可方便转换至其他目的载体。 按照其网页上的促销价:900RMB/clone × 100 = 9万RMB, 直接买,不用等时间,就可搞定,批量买估计还可以讲价,关键的是品质有保证。 注:非公司托儿,因前段时间帮朋友筹划项目专门研究
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