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- qPCR探针合成
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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
湖州河马生物科技有限公司
- 服务名称：
qPCR探针合成
- 规格：
2OD
产品名称：qPCR探针合成
服务内容：
专业的合成和纯化服务，为每一条探针经过严格质控，为您的实验保驾护航，适用于分子检测与基因诊断；荧光基团稳定，定量精准，医学检验qPCR佳选；
注：若无特殊要求，寡核苷酸修饰均为HPLC纯化；
此发货周期为合成11-60nt的寡核苷酸，其它长度周期咨询技术支持。
服务承诺：
提供Thermo LTQ XL 高精度质谱报告和 Waters 高效液相色谱纯度检测报告；
高精度质谱，单一主峰，理论分子量与检测分子量一致；纯度大于90%；
提供探针设计问题反馈与交流，博士技术支持指导；
服务特色：
超短链DNA/RNA合成，可提供短至2nt DNA/RNA合成服务。
超长链DNA/RNA合成，可提供最长200nt DNA、70nt RNA合成服务。
DNA/RNA修饰种类多，经验丰富。
修饰DNA/RNA合成质谱全检，waters高效液相色谱全检，客户可放心使用。
合成规模灵活，可提供微克至百克级合成服务。
发货迅速，常规修饰2-3个工作日发货。
临床检测级别纯度大于99%，高稳定性，无交叉污染。
寡核苷酸应如何保存?
DNA干粉很稳定，-20℃下保存2年没问题。DNA的溶解可以用无菌的水或TE，溶解后的DNA最好分装置于-20℃保存于-20℃，且在使用时避免反复冻融。短期内（2、3个星期）反复使用的DNA可在4℃保存。溶解后的DNA应避免室温存放，一般在室温放置超过一周的不建议继续使用。
RNA由于其稳定性远差于DNA，因此 不论是干粉还是溶液状态，都建议在-80℃保存，若无条件，则存放于-20℃，且溶液状态的RNA要避免反复冻融。修饰寡核苷酸建议最高存放于-20℃，带荧光的修饰需要避光保存。
服务内容：
专业的合成和纯化服务，为每一条探针经过严格质控，为您的实验保驾护航，适用于分子检测与基因诊断；荧光基团稳定，定量精准，医学检验qPCR佳选；
| 荧光染料 (Fluorescent Dye) | 吸收光/发射光 (nm) | 颜色 | 周期(工作日） | ||
| 荧光修饰 | 5'-FAM (FITC) | 495/520 | 绿色 | 2-3 | |
| dT-FAM (FITC) | 2-3 | ||||
| 3'-FAM (FITC) | 2-3 | ||||
| 5'-TET | 521/536 | 橙色 | 2-3 | ||
| 5’-JOE | 527/548 | 粉红色 | 2-3 | ||
| 5'-HEX | 535/556 | 粉红色 | 2-3 | ||
| 3'-HEX | 2-3 | ||||
| 5'-VIC | 538/554 | 粉红色 | 2-3 | ||
| 5'-TAMRA | 544/576 | 玫瑰红色 | 2-3 | ||
| dT-TAMRA | 2-3 | ||||
| 3'-TAMRA | 2-3 | ||||
| 5'-Cy3 | 550/570 | 红色 | 2-3 | ||
| 3'-Cy3 | 2-3 | ||||
| 5'-Quasar570 | 550/570 | 红色 | 2-3 | ||
| 3'-Quasar570 | 2-3 | ||||
| 5'-ROX | 576/601 | 红色 | 2-3 | ||
| dT-ROX | 2-3 | ||||
| 3'-ROX | 2-3 | ||||
| 5'-Cy5 | 650/670 | 紫色 | 2-3 | ||
| 3'-Cy5 | 2-3 | ||||
| 5'-Quasar670 | 650/670 | 紫色 | 2-3 | ||
| dT-Quasar670 | 2-3 | ||||
| 5'-Quasar670 | 2-3 |
| 标记类别 | 淬灭范围(nm) | 周期(工作日） | ||
| 淬灭基团 | 5'-Dabcyl | 380-530 | 2-3 | |
| dT-Dabcyl | 2-3 | |||
| 3'-Dabcyl | 2-3 | |||
| 5'-BHQ1 | 480-580 | 2-3 | ||
| dT-BHQ1 | 2-3 | |||
| 3'BHQ1 | 2-3 | |||
| 5'-BHQ2 | 550-650 | 2-3 | ||
| dT-BHQ2 | 2-3 | |||
| 3'BHQ2 | 2-3 | |||
| 3'-BHQ3 | 620-730 | 2-3 | ||
| 3’eclipse | 390-625 | 2-3 | ||
| 3'-MGB | 390-625 | 2-3 |
此发货周期为合成11-60nt的寡核苷酸，其它长度周期咨询技术支持。
服务承诺：
提供Thermo LTQ XL 高精度质谱报告和 Waters 高效液相色谱纯度检测报告；
高精度质谱，单一主峰，理论分子量与检测分子量一致；纯度大于90%；
提供探针设计问题反馈与交流，博士技术支持指导；
服务特色：
超短链DNA/RNA合成，可提供短至2nt DNA/RNA合成服务。
超长链DNA/RNA合成，可提供最长200nt DNA、70nt RNA合成服务。
DNA/RNA修饰种类多，经验丰富。
修饰DNA/RNA合成质谱全检，waters高效液相色谱全检，客户可放心使用。
合成规模灵活，可提供微克至百克级合成服务。
发货迅速，常规修饰2-3个工作日发货。
临床检测级别纯度大于99%，高稳定性，无交叉污染。
寡核苷酸应如何保存?
DNA干粉很稳定，-20℃下保存2年没问题。DNA的溶解可以用无菌的水或TE，溶解后的DNA最好分装置于-20℃保存于-20℃，且在使用时避免反复冻融。短期内（2、3个星期）反复使用的DNA可在4℃保存。溶解后的DNA应避免室温存放，一般在室温放置超过一周的不建议继续使用。
RNA由于其稳定性远差于DNA，因此 不论是干粉还是溶液状态，都建议在-80℃保存，若无条件，则存放于-20℃，且溶液状态的RNA要避免反复冻融。修饰寡核苷酸建议最高存放于-20℃，带荧光的修饰需要避光保存。
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文献和实验相关实验
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一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
为大家介绍qPCR引物设计的相关原则，并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件，最后和大家分享qPCR引物实验验证，更多干货与你分享！
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