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- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
6~12 个月
- 英文名:
rAAV-CaMKIIα-GCaMP6f
- 供应商:
枢密科技
- 规格:
滴度≥2.00E+12 vg/mL,5ul
病毒用途:
钙离子成像技术(Calcium imaging system)属于光遗传学技术中的一类,实际检测的是细胞或组织中Ca2+的浓度变化,将钙浓度变化转化为荧光信号。且钙离子是细胞信号传导中的重要信使,从而通过荧光信号强度变化来检测神经元的活动。
名称释义:
rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。
CaMKIIα:Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II,兴奋性神经元启动子。
GCaMP6f:GCaMP 蛋白,由cpEGFP 蛋白、CaM (calmodulin 钙调蛋白)、M13 肽这三个结构组成,当有钙离子存在时,CaM 和M13 结合,连带引起cpGFP 蛋白的构象,增强荧光信号。在实验中用于指示细胞中的Ca 信号活动。GCaMP6 作为新一代的GCaMP荧光蛋白,可以特异高效地反映细胞内游离Ca2+浓度的变化。它有三种常用的亚型,6s,6f 和6m,其中对于钙离子的结合力,6s>6m>6f,所以6s 最敏感,适合低频信号的指示,6f 解离最快,适合高频信号的指示,6m 结合活性适中,适用的范围最广。
钙离子成像技术(Calcium imaging system)属于光遗传学技术中的一类,实际检测的是细胞或组织中Ca2+的浓度变化,将钙浓度变化转化为荧光信号。且钙离子是细胞信号传导中的重要信使,从而通过荧光信号强度变化来检测神经元的活动。
名称释义:
rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。
CaMKIIα:Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II,兴奋性神经元启动子。
GCaMP6f:GCaMP 蛋白,由cpEGFP 蛋白、CaM (calmodulin 钙调蛋白)、M13 肽这三个结构组成,当有钙离子存在时,CaM 和M13 结合,连带引起cpGFP 蛋白的构象,增强荧光信号。在实验中用于指示细胞中的Ca 信号活动。GCaMP6 作为新一代的GCaMP荧光蛋白,可以特异高效地反映细胞内游离Ca2+浓度的变化。它有三种常用的亚型,6s,6f 和6m,其中对于钙离子的结合力,6s>6m>6f,所以6s 最敏感,适合低频信号的指示,6f 解离最快,适合高频信号的指示,6m 结合活性适中,适用的范围最广。
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文献和实验相关实验
rAAV 在神经科学研究中的应用方向 rAAV 血清型的选择 01 用于神经元示踪的血清型⸺AAV2-retro、AAV1、AAV9 使用 AAV 精确标记神经回路需要考虑可逆性,包括神经元的顺行和逆行标记,以及是否跨突触(图 2)。目前,只有两种血清型可 以用于神经元顺行标记,即 AAV1(图 3)和 AAV9,高滴度的 AAV9 可顺向跨突触。唯一可用于逆行标记是 AAV2-retro(图 4)。 图 2 AAV 等工具病毒在神经环路示踪应用中的传播方向和层级 [Neurosci
应用于活体钙成像研究,其发出荧光的原理在于钙离子浓度上升导致M13与CaM结合,从而改变cpEGFP的构象,将其从无荧光的状态变为绿色荧光 GCaMP蛋白的基本结构和原理(来自WIKI)2)常见的钙离子指示剂1、GCaMP6系列:第六代GCaMP蛋白(GCaMP6)有三种不同亚型:GCaMP6s、GCaMP6m、GCaMP6f,其特点各不相同(图4)。GCaMP6s高敏感,适合低频信号的指示,;GCaMP6f有快速动力学曲线,解离最快,适合高频信号的指示,需要根据实验需求进行选择。 图4 几种不同
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高频钙成像AAV病毒rAAV-CaMKIIα-GCaMP6f
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