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- 详细信息
- 技术资料
- 提供商:
武汉恒意赛生物
- 服务名称:
Real-Time PCR
- 规格:
PCS
实时定量PCR/Co-IP/ChIP服务
实时荧光定量PCR是在Life technologies公司的StepOne™ Real-Time PCR仪上完成,每个样品均作3个复孔,使用EnTurbo™ SYBR Green PCR SuperMix试剂盒进行(ELK Biotechnology,EQ001):
(1)反应程序为:预变性 95℃,3min
循环(40次) 95℃,10s→58℃,30s→72℃,30s
熔解曲线 仪器默认设置
(2)反应体系为:
| 试剂 | 使用量 |
| 2×Master Mix | 5.0 μL |
| 引物工作液(2.5μM) | 1.0 μL |
| Template | 1.0 μL |
| ddH2O | 2.0 μL |
| Rox | 1.0 μL |
(3)、附录
1、数据分析方法
ΔΔCT法:
A=CT(目的基因,实验样本)- CT(内标基因,实验样本)
B=CT(目的基因,对照样本)- CT(内标基因,对照样本)
K=A-B
表达倍数=2-K
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