丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 微量法(旧版）

为持续提升检测性能，BC6410/BC6415 丙二醛（MDA）含量检测试剂盒（升级版）将于 2025 年 06 月 25 日正式替代现有产品（BC0020/BC0025 丙二醛（MDA）含量检测试剂盒）。

此次升级通过引入新型稳定剂，提升反应液稳定性，显色效率提升，更加适配复杂样本基质，显著提升产品灵敏度。

订购指引：若已经使用 BC0020/BC0025 测定了部分样本数据，为保证实验数据的延续性，更建议您继续使用该货号。

丙二醛（MDA）含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0025
规格：100T/96S
产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
MDA检测工作液的配制：临用前取1瓶试剂二加入20mL试剂一，溶解混匀，2-8℃保存一个月。MDA检测工作液较难溶解，可以70℃加热，并剧烈振荡以促进溶解，或者通过超声处理以促进溶解。
产品说明：
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括丙二醛（MDA）。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
丙二醛（MDA）在酸性和高温条件下，可以与硫代巴*（thiobarbituric acid，TBA）缩合，生成棕红色的三甲川（3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮），其最大吸收波长在532nm。进行比色后可估测样本中MDA的含量。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：

1. 1. 1. 1. 若发现检测样本吸光值过低，可以将沸水浴时间60min调整为90min或者更长，但同一实验中的MDA的检测都需要延长到同一时间以免引起误差。

实验实例：

1. 取马血清按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA532=A532_测定-A532_空白=0.078-0.047=0.031，ΔA600=A600_测定-A600_空白=0.053-0.043=0.01，ΔA=ΔA532-ΔA600=0.021按体积计：

MDA含量（nmol/mL）=53.763×ΔA×F =1.129 nmol/mL。

1. 取500万hela细胞，加1mL提取液进行样本处理，离心取上清后按测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA532=A532_测定-A532_空白=0.101-0.046=0.055，ΔA600=A600_测定-A600_空白=0.043-0.043=0，ΔA=ΔA532-ΔA600 = 0.055，按照细菌或细胞数量计算：

MDA含量（nmol/10⁴ cell）=0.1075×ΔA×F =0.006nmol/10⁴ cell

1. 取0.1g 小鼠肝脏，加1mL提取液进行样本处理，离心取上清后按测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA532=A532_测定-A532_空白=0.196-0.047=0.149，ΔA600=A600_测定-A600_空白=0.125-0.043=0.082，ΔA=ΔA532-ΔA600= 0.067，按照样本质量计算：

MDA含量（nmol/g 质量）= 53.763×ΔA÷W×F =36.02 nmol/g 质量
相关发表文献：

1. QianYi Peng,YiMin Wang,CaiXia Chen,et al. Inhibiting the CD38/cADPR pathway protected rats against sepsis associated brain injury. Brain Research. January 2018;(IF2.929）
2. Zhigang Chen, Qiaoling Yuan, Guangren Xu,et al. Effects of Quercetin on Proliferation and H2O2-Induced Apoptosis of Intestinal Porcine Enterocyte Cells. Molecules. 2018; (IF3.06)
3. Huiwen Xiao, Yuan Li, Dan Luo,et al. Hydrogen-water ameliorates radiation-induced gastrointestinal toxicity via MyD88’s effects on the gut microbiota. experimental and molecular medicine. January 2018;(IF4.743)
4. Xuejuan Xia,Yuxiao,Xing,Guannan Li,e alc. Antioxidant activity of whole grain Qingke (Tibetan Hordeum vulgare L.) toward oxidative stress in d-galactose induced mouse model. Journal of Functional Foods. June 2018;(IF3.197)
5. Qilong Wang, Guosheng Xiao, Guoliang Chen,et al. Toxic effect of microcystin-LR on blood vessel development. Toxicological & Environmental Chemistry. Feb 2019;(IF3.547)
6. Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of Plant Physiology. October 2018;(IF2.825)
7. Lijiao Gu, Hantao Wang, Hengling Wei,et al. Identification, Expression, and Functional Analysis of the Group IId WRKY Subfamily in Upland Cotton (Gossypium hirsutum L). Frontier in Immunology. November 2018;(IF4.259)
8. Ping Shao,Pei Wang,Ben Niu,et al. Environmental stress stability of pectin-stabilized resveratrol liposomes with different degree of esterification. International Journal of Biological Macromolecules. November 2018;(IF4.784)

参考文献：
[1] Spitz D R , Oberley L W . An assay for superoxide dismutase activity in mammalian tissue homogenates[J]. Analytical Biochemistry,1989
[2] Masayasu M , Hiroshi Y . A simplified assay method of superoxide dismutase activity for clinical use[J]. Clinica Chimica Acta.
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