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- CA1030
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
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大量现货
- 英文名：
Annexin V PE/7-AAD
- 保质期：
2-8°C 避光保存，勿冰冻。
- 供应商：
索莱宝
- 保存条件：
现询
- 规格：
20T/50T/100T
| 规格： | 20T | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥1560.0 |
| 规格： | 100T | 产品价格： | ￥2800.0 |
Annexin V-PE/7-AAD 凋亡流式检测试剂盒
产品简介：
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使 PS 暴露在细胞膜外表面。PS 是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS 暴露在细胞膜外。Annexin V 具有易于结合到磷脂类如 PS 的特性，对 PS 有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的 PS。PS 转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此，可以采用 AnnexinV 与7-AAD 双染的方法，通过流式检测细胞早期凋亡。
操作步骤:
标记的 Annexin V 可结合流式细胞仪用于检测细胞外膜上的磷酯酰丝氨酸
1.用去离子水按 1:4 稀释结合缓冲液（4ml 结合缓冲液+12ml 去离子水）；
2.用 4℃预冷的 PBS 洗细胞两次，用 250ul 结合缓冲液重新悬浮细胞，调节其浓度为 1× 106/ml；
3.取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V/PE 和 10μl 7AAD 溶液；
4.混匀后于室温避光孵育 15 分钟；
5.在反应管中加 400μl PBS，流式细胞仪（FACS）分析
（注：消化细胞时不能用含 EDTA 的胰酶）
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相关文献：
《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影响因子:3.062 PMID:30076744
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文献和实验Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
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