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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
DNA 快速连接试剂盒
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
30 次
服务流程：
1）DNA 快速连接试剂盒30 次规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. DNA 快速连接试剂盒30 次规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. DNA 快速连接试剂盒30 次规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0100mL 植物叶绿体蛋白提取试剂盒50 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5100mL 植物线粒体总蛋白提取试剂盒50 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0100mL 植物蛋白酶抑制剂1mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL 植物 RNAout50 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 9.0100mL 植物 DNAout50 次
Southern 专用 DNA Marker(DIG)20 次 胚胎裂解液1mL
Southern Marker DL2000( 生物素 )20 次 牛血清白蛋白标准品，2mg/mL1mL
Southern Marker DL2000(DIG)20 次 牛血清 γ 球蛋白标准品，2mg/mL1mL
Southern Marker Oligo( 生物素 )20 次 凝胶法内毒素半定量试剂盒10x0.1mL
Southern Marker Oligo(DIG)20 次 凝胶法 miRNA 分离试剂盒
亲和层析柱1 mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5100mL
亲和层析柱3 mL RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL
亲和层析柱6 mL RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%100mL
亲和层析柱12 mL RNase-free PVP K30 溶液 ,20%100mL
亲和层析柱30 mL RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0100mL
冰核细菌 黄绿绿僵菌
红曲霉菌 杰丁汉逊酵母
苏云金芽胞杆菌莫氏变种Bacillusthuringiensisvar.merrisoni 嗜水气单胞菌
大肠埃希菌ATCC25922冻干粉 白腐菌
刺孢吸水链霉菌 缺陷假单胞菌冻干粉
发根土壤杆菌（发根植物单胞菌） 乙型副伤寒沙门菌CMCC50094冻干粉南京便诊
威尔酵母 大豆慢生根瘤菌
叶柄粘球菌 头状丝孢酵母
热带念珠菌ATCC750冻干粉 发根土壤杆菌(发根植物单胞菌)
泡盛曲霉 肠膜明串珠菌
DNA 快速连接试剂盒30 次规格红曲霉 嗜热乳酸链球菌
鹿皮色曲霉 红法夫酵母
甲型副伤寒沙门菌冻干粉 南方树舌
氧化微杆菌 多主枝孢
居海洛克氏菌 白色念珠菌冻干粉
实验步骤：
(1) DNA 快速连接试剂盒30 次规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶，反应10分钟。平滑末端连接：在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时，或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外，NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1：在25°C条件下，用1 unit（1:400稀释后取1 µl）T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
在论文修改了 20 次之后，我才发现原来可以这样......
的人很少，但是在计算机领域可谓是如雷贯耳，如果你不知道 Git 好比你不知道 DNA 一样。Git 的发明人是 Linus Torvalds（我们简称莱叔叔好了）。他早年最著名的事情就是创造了 Linux 系统。莱叔叔用了两周时间用 C 语言写了一个分布式版本控制系统，这就是 Git！一个月之内，Linux 系统的源码已经由 Git 管理了！牛是什么感觉，大家可以体会一下。・・・如何安装今天小编将向大家展示如何用 Git 来对 word 版本管理。首先需要下载 Git 和 SourceTree（这是
人可溶性CD30 分子 (sCD30)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 sCD30 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 sCD30与单抗结合，加入生物素化的抗人 sCD30 ，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后
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