RNase-free 水10mL费用

实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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RNase-free 水10mL费用详细介绍：

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是RNase-free 水10mL费用的相关产品：
常用PCR引物100uL  大鼠 NK 细胞分离液 1.068200mL
第六章 “克必隆”克隆及表达产品  大片段 DNA 分子量标准50μg
加 A 试剂盒50 次  磁珠植物 DNAout50 次
加 T 试剂盒50 次  磁珠血液 DNAout50 次
DNA 粘转平试剂盒20 次  磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次
去离子甲酰胺100mL  间充质干细胞脂防细胞分化生长因子5mL
BLOTTO 溶液100mL  间充质干细胞生长因子5mL
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL  间充质干细胞生长因子 - 无血淸5mL
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL  间充质干细胞软骨细胞分化生长因子5mL
Denhardt 溶液，50×100mL  间充质干细胞成骨细胞分化生长因子5mL
即用型封堵液 (Nylon 专用 )50mL  即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次
硝酸纤维素膜，13×20cm1张  即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)20 次
硝酸纤维素膜，13×20cm1张  即用型蓝白 T 载体 C 型 (T7-T3，无 MCS)20 次
尼龙膜，13×20cm1张  即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次
分子杂交炉1台  即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6，有 MCS)20 次
志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素  英文名称；  Shigella Broth  规格；  250g
尿素琼脂（PH7.2）  英文名称；  Urease Agar Base  规格；  250g
新生霉素（125ug/支）  英文名称；    规格；  125ug/支*5
半固体营养琼脂  英文名称；  Semisolid Nutrient Agar  规格；  250g
麦康凯琼脂(MAC)  英文名称；  MaConkey Agar  规格；  250g
萘啶酮酸  Nalidixic Acid  1.5mg/支*5
肠球菌琼脂  Enterococcus Agar  250g
滤膜肠球菌琼脂  Filter Membrane Enterococcus Agar  250g
CATC琼脂  CATC Agar  250g
胆盐七叶苷琼脂  Bile Esculin Agar  250g
RNase-free 水10mL费用叠氮钠葡萄糖肉汤  用于链球菌的增菌培养用途:用于链球菌的增菌培养。成分(g/L)胰蛋白胨 15.0牛肉浸粉 4.5氯化钠 7.5葡萄糖 7.5叠氮钠 0.2pH值7.0 - 7.4 25℃用法称取本品34.7g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装，121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
乙基紫叠氮钠肉汤  用于链球菌的增菌培养用途:用于链球菌的增菌培养。成分(g/L)酪蛋白胨 13.5酵母浸粉 6.5葡萄糖 5.0氯化钠 5.0磷酸氢二钠 2.7磷酸二氢钠 2.7叠氮钠 0.4乙基紫 0.00083pH值7.0±0.2 25℃用法称取本品 35.8g,溶解于1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
KF链球菌琼脂  用于链球菌的选择性分离及计数（GB、SN标准）用途:用于粪链球菌的选择性分离培养及计数。成分(g/L)月示蛋白胨 10.0酵母粉 10.0甘油磷酸钠 10.0氯化钠 5.0麦芽糖 20.0乳糖 1.0叠氮钠 0.4琼脂 13.0溴紫 0.015pH值7.2±0.2 25℃用法称取本品 69.4g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,煮沸至完全溶解,冷却至 50-60℃时,加入无菌 1% TTC 溶液10ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。
萘啶酮酸  每支添加于100mlHB8297-1中，用于猪链球菌增菌培养每支添加于100ml脑心浸液肉汤培养基中，用于猪链球菌增菌培养
操作步骤:
1. RNase-free 水10mL费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。