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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
lambda(λ)DNA
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5μg
(1) lambda(λ)DNA5μg说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是lambda(λ)DNA5μg说明书的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品:

储存事项:
A. lambda(λ)DNA5μg说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. lambda(λ)DNA5μg说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Cycloheximide50mg CFDA SE ( 细胞增殖示踪荧光探针 )5mg
Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )50mg cDNA 第一链合成试剂盒50 次
Decitabine 地西他滨5mg cDNA 第一链合成试剂盒10 次
Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素100μL cDNA 第二链合成试剂盒30 次
Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL Catechin hydrate( 抗氧化剂 )0.5g
RNA 洗脱液10mL 制霉菌素溶液 ,2mg/mL10mL
RNA 洗脱液50mL 植物总蛋白质微量提取试剂盒 (SDS-PAGE)30 次
RNA 溶解液10mL 植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE) 30 次
植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE) 100 次
RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL 植物种属鉴定 PCR Mix 9100 次
植物种属鉴定 PCR Mix 8100 次 大提柱式血液 DNAout4次
植物种属鉴定 PCR Mix 9100 次 大提柱式细菌 RNAout5次
植物种属鉴定 PCR Mix 10100 次 大提柱式细菌 DNAout4次
植物种属鉴定 PCR Mix 11100 次 大提柱式细菌 DNAout( 含溶菌酶 )4次
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次 大提柱式土壤 DNAout4次
巴氏醋杆菌巴氏亚种 Citreicellaaestuarii 模式菌株
拉曼被孢霉 鲍氏志贺菌CMCC51522冻干粉南京便诊
苏云金芽胞杆菌云南亚种Bacillusthuringiensissubsp.yunnanensis 青春双歧杆菌
屎肠球菌ATCC35667冻干粉 乳酸链球菌
淡紫灰链霉菌 运动发酵单孢菌
大豆根瘤菌 产气荚膜梭菌
泛养副球菌 戊糖乳杆菌
酵米面假单胞菌(酵米面黄杆菌) 地生翅孢壳
拟康氏木霉 头状丝孢酵母
海枣曲霉 苏云金杆菌太平洋亚种 Bacillus thuringiensis subsp.pacificus
lambda(λ)DNA5μg说明书改良马丁琼脂培养基90mm 酿酒酵母 酒精酵母
哈茨木霉 酿酒酵母 面包酵母LI
海藻希瓦氏菌 木醋杆菌
洛格酵母 点头根霉
改良马丁培养基100ml 浅灰链霉菌
服务流程:
1)lambda(λ)DNA5μg说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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文献和实验Recombineering/Lambda red-mediated gene replacement
For electroporation step, include 2 conditions: +/- PCR fragment Chill electroporation cuvettes for 5 minutes on ice Add 5 pg to 0.5 μg PCR amplified DNA to cells Set electroporation apparatus to 2.5 kV, 25 μF. Set the pulse controller
David Harry Institute of Forest Genetics USDA Forest Service Pacific Southwest Research Station August 26, 1993 Background : There are many published methods for mini-preps of DNA from lambda phage cloning vectors. This one has worked
Clone Excision Methods for the Lambda ZAP-Based Vectors
The Lambda ZAP� vectors have been designed to allow in vivo excision and recircularization of the cloned insert and phagemid sequences contained within the λ vector (1 ). Once a Lambda ZAP library is constructed and amplified, putative
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