lambda(λ)DNA5μg品牌

实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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lambda(λ)DNA5μg品牌详细介绍：

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是lambda(λ)DNA5μg品牌的相关产品：
Dansyl chloride 100mg  DNA 电泳分子量标准 (3)pUC19/MspI50 次
Di-2-ANEPEQ 5mg  DNA 电泳分子量标准 (3)pBR322/MspI50 次
Di-8-ANEPPS5mg  DNA 电泳分子量标准 (3)pBR322/BstN I50 次
DiBAC4(3)25mg  DNA 电泳分子量标准 (250-1500 bp)50 次
Dihydroethidium( 超氧化物阴离子荧光探针 )5mg  DNA 电泳分子量标准 (200-5000 bp)
RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0100mL  植物种属鉴定 PCR Mix 8100 次
RNase-free 75% 乙醇250mL  植物种属鉴定 PCR Mix 7100 次
RNase-free 盐酸胍溶液 ,8M100mL  植物种属鉴定 PCR Mix 6100 次
RNase-free 异硫酸胍溶液 ,5M100mL  植物种属鉴定 PCR Mix 5100 次
RNase-free 氯化溶液 ,10M100mL  植物种属鉴定 PCR Mix 4100 次
植物种属鉴定 PCR Mix 3100 次  大提柱式植物 DNAout4次
植物种属鉴定 PCR Mix 4100 次  大提柱式真菌 RNAout5次
植物种属鉴定 PCR Mix 5100 次  大提柱式真菌 DNAout4次
植物种属鉴定 PCR Mix 6100 次  大提柱式藻类 RNAout5次
植物种属鉴定 PCR Mix 7100 次  大提柱式血液 RNAout5次
巴氏葡萄球菌   亮白曲霉
类球红细菌(球形红杆菌)   光孢短柄帚霉
宽鳞大孔菌   少动鞘氨醇单胞菌
许旺酵母   苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种
直立毛霉   凸形假单胞杆菌
大豆根瘤菌   过渡原囊菌
双重轮丝链霉菌   厚孢根霉
胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm用于普通表面或醇类与酚类消毒剂的物表   蚀脉镰孢霉
雅致放射毛霉=葡匐放射毛霉   多形鲁氏酵母
德氏乳杆菌乳酸亚种（莱氏曼氏乳杆菌）   粘质沙雷氏菌
lambda(λ)DNA5μg品牌改良马丁琼脂培养基90mm   阴沟肠杆菌阴沟亚种
熏衣草灰链霉菌   粪肠球菌
木糖氧化产碱菌木糖氧化亚种   华美链霉菌
胶红酵母   土白蚁丛毛单胞菌
粉状毕赤酵母   痢疾志贺菌CMCC51252冻干粉南京便诊
操作步骤:
1. lambda(λ)DNA5μg品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。