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- 百奥莱博
- SY0282-ZVD
- 北京
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
359
- 英文名：
Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
20T
特别提示：包括零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)
英文名称：Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted
产品货号：SY0282
产品规格：20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶（Topoisomerase）高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成，与传统的T4连接酶相比，具有以下优势：
1）快速，仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2）高效，无自连，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；
3）操作简单，从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏。
4）可连接长达10kb目的产物；
5）本产品不含多克隆酶切位点（MCS），使用者在引入后续酶切位点进行酶切操作时，不会受到MCS位点的影响，从而增加酶切效率以及克隆成功率。
产品用途：A尾PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。
产品组份：
pESI-T simple vector (30ng/μl)————20μl
1kb control insert (40ng/μl)——————5μl
10×Enhancer————————20μl
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。
除了零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点),，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN130804 | 单细胞裂解液(RNA提取) | 1mL |
| BTN60107 | DNA粘转平试剂盒 | 20次 |
| BTN140388 | 酿酒酵母NMY51感受态细胞 | 10×100μL |
| BTN120682 | 杆菌肽溶液 | 1mL |
| BTN120687 | 环孢霉素A | 1mL |
| BTN131232 | 壮观霉素溶液 | 10mL |
| YT002 | 质粒中量抽提试剂盒 | 50次 |
| YT005 | RNase A (10mg/ml)(不含DNase) | 1ml |
| YT476 | N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白) | 1μg |
| YT477 | N端mCherry标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白) | 1μg |
| YT482 | N端Myc标签融合蛋白质粒 | 1μg |
| ALH352 | DNA加A尾试剂盒 | 50次 |
| RFT114 | JM110化学感受态细胞 | 20×100μl |
| SY0014 | BL21 (DE3)化学感受态细胞 | 100μl×10管 |
| SY0021 | 多点突变试剂盒 | 10 rxn |
| JN0101 | Simple Cloning T载体(pSC-T) | 20次 |
| JN0103 | Easy Cloning T载体(pEC-T) | 20次 |
| JN0105 | 2×pED-T vector快速连接预混液 | 20次 |
| QN1051 | 氯霉素试剂 | 10g |
| MQ0001 | DH5α化学感受态细胞 | 20×100μl/100×100μl |
| MQ0010 | DB3.1化学感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| MQ0022 | Turbo化学感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| MQ0032 | Stable电击感受态细胞 | 5×50μl/20×50μl |
| MQ0044 | Rosetta-gami(DE3)pLysS化学感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| MQ0047 | OrigamiB(DE3)化学感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| MQ0054 | EHA105农杆菌感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| MQ0058 | GV3101农杆菌电转感受态细胞 | 10×50μl/50×50μl |
| BTN160685K | 零背景通用型克隆试剂盒(Kan抗性) | 25次 |
| MT0064 | 常温稳定DH5a感受态细胞 | 20×100μl |
| QN2145 | TOP10受体菌 | 1ml |
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文献和实验后都只是平端产物。这种平端克隆往往效率低，并且有非特异性背景菌落产生，造成筛选困难。Topo平端克隆主要改良载体设计，把ccdB （Control of cell death）基因并入到mcs中，如果没有DNA片断插入，ccdB基因则会表达，ccdB基因的表达蛋白，会破坏细菌的DNA gyrase，造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断，则ccdB基因表达受到阻碍，所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善，节省筛选的时间。Topo平端克隆与Topo TA方法一样，操作简单快速。Zero
PCR Cloning Kit）（Topo XL PCR Cloning Kit） 因为越来越多高确限度热稳定酶如Pfx、Pfu被用于PCR 扩增，使到PCR 后都只是平端产物。这种平端克隆 往往效率低，并且有非特异性背景菌落产生，造成筛选困难。 Topo平端克隆 主要改良载体设计，把ccdB （Control of cell death）基因并入到mcs中，如果没有DNA片断插入，ccdB基因则会表达
℃，而拓扑异构酶I则偏爱室温。这个室温是指22-23℃，应特别注意。很多时候我们实验室的室内温度并不满足条件。TOPO克隆得到的菌落可能不如TA克隆多，不过质量高，95%左右都是重组子。价格约为5748元/20次，时间就是金钱，这下体会到了吧。 如果你用的是高保真酶，你可以选择在PCR之后加A，或者你直接选择平端克隆试剂盒。由于载体会自连，所以平末端克隆的背景会很高。为了避免这个问题，Invitrogen开发了Zero Background(零背景)技术，用在TOPO载体上。这个技术
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