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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl)
- 保质期:
有效期3年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
250U
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/µL) 虾碱性磷酸酶 |
10322ES72 |
250 U |
656.00 |
产品描述
Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板。
本品为虾来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化,无论末端为粘端,还是平端。SAP 也可以用来降解PCR 反应中的dNTP,用于后续测序和SNP分析。
产品组分

| 组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
| 10322ES72(250 U) |
||
| 10322-A |
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/µL) |
250 U |
| 10322-B |
10×SAP buffer |
1 mL |
产品性质
| 来源(Source) |
来自毕赤酵母,克隆有北极虾(Pandalus rorealis)的虾碱性磷酸酶基因 |
| 质量控制(Quality Control) |
无核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶污染 |
| 纯度(Purity) |
>95% |
| 热灭活(Thermal Inactivation) |
65℃温浴5 min,活性完全不可逆丧失 |
| 活性定义(Unit definition) |
在25℃条件下,30分钟能使1 μg经HindⅢ(产生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位为1个活力单位。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期3年。
注意事项
1)1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0),1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃温育。
2)热失活:65℃加热5分钟,不可逆失活。当完成去磷酸化反应后,无需纯化产物,可以直接用于后续连接反应。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4) 本产品仅作科研用途!
使用方法
DNA去磷酸化
① 在EP管中加入下列试剂*:
| 组分 |
体积 |
| DNA 片段** |
1 pmol |
| 10×rSAP buffer |
2 µL |
| Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/µL) |
1 µL |
| 无菌ddH2O |
Up to 20 µL |
【*】可根据比例相应放大反应体系。
【**】1 pmol DNA片段量约相当于1 ug 3kb大小的质粒。
② 混匀上述试剂,于25℃孵育30 min。
③ 将EP管65℃,5 min温浴,终止反应。
相关产品
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| Alkaline Phosphatase (30 U/μL), Calf Intestine (CIAP) 小牛肠碱性磷酸酶 |
10321ES80 |
1000 U |
| Exonuclease I (E. coli) I型核酸外切酶 |
10320ES81/93 |
1500 U/15000 U |
HB220114
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文献和实验Phosphatasing with Shrimp Alkaline Phosphatase (S.A.P.)
Phosphatasing with Shrimp Alkaline Phosphatase (S.A.P.) Use to prevent linearized vector plasmid from recircularizing. The phosphatase from shrimp is easier to get rid of than is CIP, because SAP is heat labile.
Cloning via Restriction Digests
the vector, you will need to use a phosphatase to prevent re-circularization of the vector. CIP (calf alkaline phosphatase) or SAP (shrimp alkaline phosphatase) are commonly used. Follow the manufacturer''s instructions.
CLONING FROM BEGINNING TO END 详细的克隆操作过程【UCSF】
,resuspend with dW d.Add Alkaline Phosphatase with buffer (see below).1μg DNA requires a 10μl reaction (scale up as desired)... Reaction should end up: 1 unit Alkaline Phosphatase(AP or "CIP")/ 1μg DNA Dilute 10X buffer to 1X Bring up to volume with dW











