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虾碱性磷酸酶Shrimp Al
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Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl)
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有效期3年
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
-20℃
250 U
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格(元)
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/µL) 虾碱性磷酸酶
10322ES72
656.00
产品描述
Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板。
本品为虾来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化,无论末端为粘端,还是平端。SAP 也可以用来降解PCR 反应中的dNTP,用于后续测序和SNP分析。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编号/规格
10322ES72(250 U)
10322-A
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/µL)
10322-B
10×SAP buffer
1 mL
产品性质
来源(Source)
来自毕赤酵母,克隆有北极虾(Pandalus rorealis)的虾碱性磷酸酶基因
质量控制(Quality Control)
无核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶污染
纯度(Purity)
>95%
热灭活(Thermal Inactivation)
65℃温浴5 min,活性完全不可逆丧失
活性定义(Unit definition)
在25℃条件下,30分钟能使1 μg经HindⅢ(产生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位为1个活力单位。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期3年。
注意事项
1)1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0),1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃温育。
2)热失活:65℃加热5分钟,不可逆失活。当完成去磷酸化反应后,无需纯化产物,可以直接用于后续连接反应。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4) 本产品仅作科研用途!
使用方法
DNA去磷酸化
① 在EP管中加入下列试剂*:
组分
体积
DNA 片段**
1 pmol
10×rSAP buffer
2 µL
Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/µL)
1 µL
无菌ddH2O
Up to 20 µL
【*】可根据比例相应放大反应体系。
【**】1 pmol DNA片段量约相当于1 ug 3kb大小的质粒。
② 混匀上述试剂,于25℃孵育30 min。
③ 将EP管65℃,5 min温浴,终止反应。
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货号
Alkaline Phosphatase (30 U/μL), Calf Intestine (CIAP) 小牛肠碱性磷酸酶
10321ES80
1000 U
Exonuclease I (E. coli) I型核酸外切酶
10320ES81/93
1500 U/15000 U
HB220114
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