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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl)
- 保质期:
有效期3年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
250 U(10322ES72)
产品描述:
Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’端无磷酸基团,因而不可以和自身3’端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板。
本品为虾来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化,无论末端为粘端,还是平端。SAP也可以用来降解PCR反应中的dNTP,用于后续测序和SNP分析。
产品特色:
| 来源(Source) | 来自毕赤酵母,克隆有北极虾(Pandalus rorealis)的虾碱性磷酸酶基因 |
| 质量控制(Quality Control) | 无核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶污染 |
| 纯度(Purity) | >95% |
| 热灭活(Thermal Inactivation) | 65℃温浴5 min,活性完全不可逆丧失 |
| 活性定义(Unit definition) | 在25℃条件下,30分钟能使1 μg经HindⅢ(产生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位为1个活力单位。 |
储存条件:
-25~-15℃保存,有效期3年。
FAQ
小牛肠碱性磷酸酶,在底物浓度高时,CIAP的最适pH约为10;底物浓度低时,最适pH约为8,但特异性比高底物浓度时低。同时,其在保存条件下极其稳定,但在螯合剂存在条件下,经65℃、30分钟加热处理99%的活性不可逆失活。失活处理时,建议试用苯|酚,从而使酶完全失活。
虾碱性磷酸酶,可以在65℃ 加热 5 分钟的条件下不可逆失活。同时,在进行去磷酸化反应之后,不需要纯化产物,可直接用于后续的连接反应。虾碱性磷酸酶也可以用来降解PCR反应中的游离dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化,可直接用于下游
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文献和实验[ 1 ]Comparison of chondrogenesis-related biological behaviors between human urine-derived stem cells and human bone marrow mesenchymal stem cells from the same individual
Journal:Stem Cell Research & Therapy|DOI:10.1186/s13287-021-02370-1|IF:6.83
[ 2 ]Detection of Bacterial Alkaline Phosphatase Activity by Enzymatic In Situ Self-Assembly of the AIEgen-Peptide Conjugate
Journal:ANALYTICAL CHEMISTRY|DOI:10.1021/acs.analchem.9b05704|IF:6.79
[ 3 ]Layer-Number-Dependent Effects of Graphene Oxide on the Pluripotency of Mouse Embryonic Stem Cells Through the Regulation of the Interaction Between the Extracellular Matrix and Integrins
Journal:International Journal of Nanomedicine|DOI:10.2147/IJN.S301892|IF:6.4
Phosphatasing with Shrimp Alkaline Phosphatase (S.A.P.)
Phosphatasing with Shrimp Alkaline Phosphatase (S.A.P.) Use to prevent linearized vector plasmid from recircularizing. The phosphatase from shrimp is easier to get rid of than is CIP, because SAP is heat labile.
Cloning via Restriction Digests
the vector, you will need to use a phosphatase to prevent re-circularization of the vector. CIP (calf alkaline phosphatase) or SAP (shrimp alkaline phosphatase) are commonly used. Follow the manufacturer''s instructions.
CLONING FROM BEGINNING TO END 详细的克隆操作过程【UCSF】
,resuspend with dW d.Add Alkaline Phosphatase with buffer (see below).1μg DNA requires a 10μl reaction (scale up as desired)... Reaction should end up: 1 unit Alkaline Phosphatase(AP or "CIP")/ 1μg DNA Dilute 10X buffer to 1X Bring up to volume with dW
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