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文献和实验SABC 法与其他免疫组织化学染色方法比较 SP法或SAP法 该法由于用链霉亲和素替代ABC法中的亲和素―生物素复合物,因此背景清晰,敏感性增加,无非特异性染色,阳性反应易于辨认。是目前最常用的方法。在操作步骤中,与SABC法相比,仅有一个步骤不同,即试剂盒中的链霉菌抗生物素―过氧化物酶替代了亲和素―生物 素―过氧化物酶。因此无需使用生物素阻断剂消除内源性生物素。SP法与SAP法的区别在于前者的放大系统为链霉亲和素―过氧化物酶,后者是链霉亲和素―碱性磷酸酶,故导致
、Alkaline Phosphatases Q-1: 虾来源的酶 (SAP)、大肠杆菌来源的酶 (BAP)、小牛肠来源的酶 (CIAP)特性比较。 Q-2: BAP、CIAP和SAP的区别。 Q-3: SAP降解PCR反应后残存dNTP的反应体系。 Q-4: 如何提高Alkaline Phosphatases去磷酸化的效率? Q-5: 限制酶处理后,不经过Buffer更换可以直接使用CIAP吗? Q-6: CIAP
甲基化分析。MassARRAY® EpiTYPER™ DNA 甲基化分析技术结合了碱基特异性酶切反应和 MALDI-TOF 检测原理,可实现多重CpG的分析检测。 碱基特异性酶切(MassCLEAVE)实验由亚硫酸氢盐处理待测 DNA 开始。经过亚硫酸氢盐处理,DNA中未甲基化的胞嘧啶 (C) 转变为尿嘧啶(U),由此在DNA模板中产生甲基化特异的序列变化。利用 5’39; 末端带有T7-启动子的引物进行 PCR 扩增,产物经 SAP (虾碱性磷酸酶)处理后用于碱基特异性的酶切反应。酶切后DNA片段的大小和分子
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