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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
56
- 英文名：
大提无内毒素质粒 DNAout
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5次
(1) 大提无内毒素质粒 DNAout5次品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是大提无内毒素质粒 DNAout5次品牌的详细介绍点击了解更多DNA纯化产品：
储存事项:
A. 大提无内毒素质粒 DNAout5次品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 大提无内毒素质粒 DNAout5次品牌组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
小鼠白介素29(IL-29)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-29 ELISA Kit
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转基因植物PRSV基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
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猪特定基因序列(Porcine)核酸检测试剂盒 48T
孟加拉红培养基(虎红琼脂)2250g供霉菌和酵母的计数、分离和培养用
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抗生素检定培养基1号(PH6.5-6.7) 250g 用于药品抗生素效价测定
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亚碲酸(庆大霉素琼脂冻干配套试剂) 规格： 2.5mg/支x10 用途： 每支添加于500ml（025050）中配成庆大霉素琼脂培养基。
亚碲酸(琼脂冻干配套试剂) 规格： 5mg/支x10 用途： 每支添加于500ml（025030）中配成琼脂培养基。
大提无内毒素质粒 DNAout5次品牌酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)2250g用于酵母菌的培养，及供药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定用。
胆盐(Bile Salts) Oxoid 250g incubation media 胆盐(Bile Salts) Oxoid 250g
马其顿假丝酵母 酱油酵母 支/瓶
LaurylSulfateTryptoseBroth
AntibioticAgarNo.2
服务流程：
1）大提无内毒素质粒 DNAout5次品牌客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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文献和实验只适合酶切测序等。而我用无内毒素大提试剂盒时，就没出现这种情况，溶度有1000多微克每毫升。所以，建议：1.要转染最好就用无内毒素大提试剂盒2.已小提，想纯化滤菌用于转染建议参考“将质粒溶液进行浓缩，每50微升质粒溶液加2微升5mol/L NaC1混匀，冷的无水乙醇沉淀质粒，10 000r/min离心5min，弃去上清，用70% 的乙醇洗1次，无菌条件下真空干燥，以灭菌生理盐水溶解质粒至质量浓度为1 微g/微L，一20度保存。质粒转染前，行酶切及测序鉴定。”
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
来看一下。提交订单，等待引物到达：华大基因的速度非常快，大约在 2 - 3 个工作日即可拿到，在等待期间需要准备好：LB + 抗生素抗性平板；感受态细胞及相应培养基；无内毒素的 Cas9 载体质粒；BbsI 限制性内切酶；质粒小提试剂盒；常规限制性内切酶。
特异性更高。您可以根据实验设计需要进行选择。 2、慢病毒包装载体：Cas9 慢病毒表达载体采用 3 质粒慢病毒系统。您可使用我公司的 pH1、pH2；addgene 载体 psPAX2、pMD2.G 或者 pCMV-dR8.2 dvpr、pCMV-VSVG 均可包装成功。 3、无内毒素质粒提取试剂盒。使用质量可靠的质粒提取试剂盒可以提供更高的转染效率和病毒包装效率。我们采用 Qiagen 的 Plasmid Plus 系列产品可以取得满意的包装效果。 4、转染
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