- ￥80 - 350
- 万生昊天
- 美国
- EZWB03-4
- 2026年04月22日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温避光
- 保质期：
12个月
- 英文名：
WB Stripping buffer (Neutral)
- 库存：
100
- 供应商：
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格：
100ml/500ml
| 规格： | 100ml | 产品价格： | ￥80.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml | 产品价格： | ￥350.0 |
本产品采用中性洗涤配方，可在不影响目的蛋白的情况下，能够去除结合在印迹膜上的抗体，使同一张膜可进行多次抗体检测，无需反复电泳和转膜，节省样品和时间，适用于使用 NC 或PVDF 膜进行 Western Blot检测时条件的优化或同一样品不同蛋白的检测。
保存条件：2~8℃保存，如果长时间不使用可以保存于-20℃。
操作流程：
- 将曝光后的膜取出，加入适量的洗脱液(洗脱液充分覆盖膜表面， 8.5cmx 5.5cm膜加入15ml左右洗脱液)，室温振摇孵育15分钟左右(孵育时间应根据不同的目的蛋白来调整：比如内参抗体等表达量较高的蛋白，使用洗脱液时可以延长孵育时间至1小时或者在37℃孵育30分钟)；
- 弃去洗脱液，用15ml缓冲液(PBST或TBST) 洗膜3次，每次5分钟，室温振摇，
- 为了检测酶标二抗洗脱是否完全，此时可以用显色方法来确定二抗是否洗脱掉；
- 待检测完毕，确认膜上无残留的酶活性，再生后的膜通过加入15ml的封闭液进行封闭，室温30分钟或者2~8℃封闭过夜；
- 重新加入待测一抗，进行下一轮的WB实验。
注意事项：
- 建议先检测表达量较低的目的蛋白，用洗脱液处理后检测表达量高的蛋白，如内参蛋白等；
- 使用ECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测， 例如DAB， NBT/BCIP，不适用于本试剂。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
- 为了您的自身安全，使用试剂前.请做好防护.如穿实验服，带手套等。
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文献和实验那么如何通过改变抗体稀释液的配方，寻求抗体孵育的最佳条件呢？首先要认清，抗体稀释液没有一个绝对通用的配方；一种抗体一个脾气。其次，抗体稀释液的配方要兼顾与特异性抗体竞争抗原的强度，以及对其他区域的封闭强度两方面的平衡。目前，抗体稀释液中可以充当封闭蛋白的主要有milk，BSA和gelatin，似乎很少的样子 。。。可是，你有没有考虑过“复方”？--这下配方无限多了吧。1. 采用milk，BSA和gelatin的单方。3% milk，5% BSA，2.很多情况下单方的浓度很高了，背景问题仍不能
Western Blot实验可以说是生物专业最基础的实验了，然而，虽然WB实验天天做，但是正常高清的结果图并不是你想有就能有。 WB 实验出现最多问题的，应该就是各种背景问题了。 你想一下，好不容易实验过五关斩六将做到最后一步，扫描结果出了，是这样的： 为什么明明跑出了想要的趋势，但就是背景脏?怎么让自己的条带不因脏脏的背景而毁了呢? 这里要清楚一点，背景脏不一定是因为仪器不干净造成的，也有可能是蛋白降解或者整个实验过程中条件不合适造成的，有可能是以下的环节出了问题
条件至关重要。1. 转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4．转膜缓冲液中甲醇比例（v/v）（三）一抗使用* 使用 IRS1（150kDa）、pPERK（125kDa）和内质网应激 XBP1（29/55kDa）抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响（IRS1，pPERK 和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带，因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键）。1. 一抗稀释溶剂2. 一抗稀释比例3. 一抗孵育时间（四）二抗使用* 高浓度的二抗会导致大量非特异性结合，造成 WB
