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文献和实验重要。1.转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4．转膜缓冲液中甲醇比例（v/v）（三）一抗使用*使用IRS1（150kDa）、pPERK（125kDa）和内质网应激XBP1（29/55kDa）抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响（IRS1，pPERK和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带，因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键）。1.一抗稀释溶剂2.一抗稀释比例3.一抗孵育时间（四）二抗使用*高浓度的二抗会导致大量非特异性结合，造成WB背景较深。1.二抗稀释比例 （洗释
条件至关重要。1. 转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4．转膜缓冲液中甲醇比例（v/v）（三）一抗使用* 使用 IRS1（150kDa）、pPERK（125kDa）和内质网应激 XBP1（29/55kDa）抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响（IRS1，pPERK 和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带，因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键）。1. 一抗稀释溶剂2. 一抗稀释比例3. 一抗孵育时间（四）二抗使用* 高浓度的二抗会导致大量非特异性结合，造成 WB
为什么要做大规模提取？ 1）节省成本：Umibio 大规模提取，同比试剂盒等方法提取节省人力成本，物力成本等 50% 以上，而且体积越大，成本优势越高； 2）提高效率：传统方法每个批次一般不会超过 300 ml，而大规模提取可以达数十升，一天内完成，以 10L 为例，时间可以压缩 90%，甚至更多； 3）方便质控：每个批次通过连续进样，最终出来的成品，通过一次的提取，不用担心每个批次提取的差异过大，数据更稳定，有说服力； 4）纯度飞跃：通过大规模提取工艺，可以大量的去除杂质，优化后纯度
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