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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
非冻型细菌 RNA 保存液
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250mL
1）非冻型细菌 RNA 保存液250mL品牌客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是非冻型细菌 RNA 保存液250mL品牌的详细介绍点击了解更多RNA纯化产品：
储存事项:
A. 非冻型细菌 RNA 保存液250mL品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 非冻型细菌 RNA 保存液250mL品牌组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) 非冻型细菌 RNA 保存液250mL品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
5(6)-TRITC10mg DNA 快速连接试剂盒100 次
5-Carboxyfluorescein100mg DNA 碱性胶上样液 ,6×10mL
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg DNA 碱性胶上样液 ,6×1.5mL
5-FITC1g DNA 级 Acryl 助沉剂1mL
Acridine Orange(AO)100mg DNA 非变性 PAGE 上样液10mL
柱式软体 RNAout50 次 柱式血液 DNA-RNAout50 次
柱式粪便 RNAout50 次 柱式血液 DNAout50 次
植物 RNAout50 次 柱式血液 DNAout200 次
柱式植物 RNAout50 次 柱式血清血浆 RNAout50 次
柱式植物 RNAout 2.050 次 柱式血清血浆 DNAout50 次
柱式血清血浆 DNAout50 次 一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次
血液和 DNA 纯化套装100 次 一站式 Tricine-SDS-PAGE 套装30 次
大提柱式血液 DNAout4次 一站式 TA 克隆试剂盒20 次
百万碱基级血液 DNAout10 次 一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次
Southern 级血液 DNAout10 次 一站式 SDS-PAGE 电泳套装30 次
Half-Fraser培养基颗粒 英文名称； Half-Fraser Medium 规格； 225ml/袋*10
Fraser培养基颗粒 英文名称； Fraser Medium 规格； 300ml/袋*10
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE)颗粒 英文名称； Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 规格； 300ml/袋*10
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,(mLST-Vm)颗粒 英文名称； Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- Vancomycin 规格； 300ml/袋*10
TCBS琼脂颗粒 英文名称； Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 规格； 300ml/袋*10
支原体琼脂培养基（含精氨酸） Mycoplasma Agar Base 250g
PPLO琼脂 PPLO Agar 250g
支原体半流培养基 Mycoplasma Semi-fluid Medium 250g
精氨酸支原体肉汤培养基 Arginine Mycoplasma Broth Meium 250g
猪支原体培养基 Pig Mycoplasma Base 250g
非冻型细菌 RNA 保存液250mL品牌营养琼脂（琼脂20g） 用途:用于样品中菌落总数的计数。1、用于样品中菌落总数计数。2、产品用法：称取本品38g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌20min，备用。
缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR-VP试验用培养基） 用于大肠杆菌的甲基红实验和VP实验用途:用于大肠杆菌的甲基红试验和 VP 试验。成分(g/L)月示胨 7.0葡萄糖 5.0磷酸氢二钾 5.0pH值6.9 ± 0.2 25℃用法称取本品 1.7g,加热溶解于100ml 蒸馏水中,分装试管，121℃高压灭菌 15 分钟备用
去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂 用于致病性肠杆菌的分离培养。去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂用于致病性肠杆菌的分离培养。
Honda氏产毒肉汤 用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养用途:用于致泻大肠埃希氏菌产毒培养。成分(g/L)酪蛋白胨 20.0酵母浸粉 10.0氯化钠 2.5磷酸氢二钾 15.0葡萄糖 5.0镁 0.025 0.0025 0.01pH值7.5±0.1 25℃用法称取本品 52.54g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,待冷至45-50℃左右时,加入过滤除菌的林可霉素溶液,每毫升培养基内含 90ug,混匀,备用。
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文献和实验50mL，搅拌均匀，置于沸水浴中提取1h。 2．分离 将上述提取液取出，立即用自来水冷却，装入大 离心管 内，以3 500r/min 离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。 3．沉淀RNA 将离心得到的上清液倾于50mL 烧杯中，并置于放有冰块的250mL 烧杯中冷却，待冷至10℃以下时，用6mol/L HCl 小心地调节pH 至2.0～2.5。随着pH 下降，溶液中白色沉淀逐渐增加，到等电点时沉淀量最多
裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率，因为一部分 RNA 会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时最好在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源 RNase 降解了 RNA。 4. 酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构，可以加入 Trizol 试剂同时加入无 RNase 的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。2-8℃ 避光保存一年。 三、预备工作 RNA酶（Rnase）是导致 RNA 降解最主要的物质。此酶非常稳定，在一些极端
-MEM漂洗细胞2次，加入无血清基础培养基opti-MEM 1.5mL； 3. 将溶解后的siRNA稀释于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中；取5-10ul脂质体混匀于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中。静置5min； 4. 将脂质体稀释液及siRAN稀释液混合，轻轻混匀，室温放置20分钟； 5. 将脂质体-siRNA混合液加入细胞培养孔中； 6. 6小时后吸弃转染复合物，换入含10%胎牛血清的新鲜培养基； 7. 细胞在 CO2 培养箱中 37 ℃温育
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