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- 2025年07月10日
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26
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL
以下是非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书的详细介绍，点击了解更多RNA纯化产品：
操作流程：
1.非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
实验要点 ：
1．非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
储存事项:
A. 在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
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非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书CHAPSO；3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-2-羟基-1-丙磺酸 CHAPSO 82473-24-3 质量规格：>99%,分子生物学级；
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二硫赤藓醇(DTE)；1,4-二硫代赤藓醇 1,4-Dithioerythritol 6892-68-8 质量规格：>99%,进分sigma
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文献和实验的纯度。 5．干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸，放在8cm 表面皿上，置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA 制品称重。 6．含量测定 称取一定量干燥后的RNA 产品配制成浓度为10～50μg/mL 的溶液，在751 型 分光光度计 上测定其260nm 处的光密度值，按下式计算RNA 含量： 式中：OD260nm 为260nm 处的光密度值；L 为比色杯的光径（cm
裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率，因为一部分 RNA 会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时最好在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源 RNase 降解了 RNA。 4. 酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构，可以加入 Trizol 试剂同时加入无 RNase 的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。2-8℃ 避光保存一年。 三、预备工作 RNA酶（Rnase）是导致 RNA 降解最主要的物质。此酶非常稳定，在一些极端
，那么在药品称量、调 pH 值等过程中 Tris 缓冲液会造到 RNase 的再次污染，所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是 RNase 并不顽固，高压灭菌可以去除其大量活性。 下面的实验照片很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单，将不同含量的 RNase 用高压灭菌处理，然后与未高压灭菌处理的 RNase 一起来降解 RNA（37 度 1 小时），结果表明，当 RNase 的污染量小于 100 ng/ml 时，高压灭菌可以去除其活性。 这张照片还说明了一个问题，当你的 RNA
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