FastDigest NotI
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  • Thermo Scientific™ FastDigest
  • FD0594
  • FastDigest NotI
  • 2025年07月15日
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      FastDigest NotI

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      50 reactions

    FastDigest NotI
    货号: FD0594
    5'     G   C ↓ G   G   C   C   G   C     3‘  
    3‘     C   G   C   C   G   G ↑ C   G     5'  

    Thermo Scientific FastDigest NotI 限制性内切酶可识别 GC^GGCCGC 位点,使用通用型 FastDigest 缓冲液于 37°C 下在5–15 分钟内的切割效果最佳。同裂酶:CciNI。

    Thermo Scientific FastDigest NotI 是一系列高端快速限制性内切酶之一,该系列在通用型 FastDigest 和 FastDigest 绿色反应缓冲液中均具备 100% 活性。

    通用型缓冲液支持 在5–15 分钟内快速完成 DNA 单酶切、双酶切或多酶切,无需更换缓冲液或后续 DNA 纯化步骤。有关该酶和其他 FastDigest 限制性内切酶的酶活性、热灭活和孵育时间的表格,请参见 FastDigest 酶的反应条件。DNA 修饰酶(如 Klenow 片段T4 DNA 连接酶、碱性磷酸酶和 T4 DNA 聚合酶)在 FastDigest 缓冲液中均具有 100% 活性。因此,在下游应用中使用的酶可直接添加至 FastDigest 反应混合物中。

    为了方便起见,FastDigest 绿色缓冲液包括用于直接将酶切反应产品上样至凝胶的 1 种密度试剂和 2 种示踪染料。

    较短的孵育时间和较优的通用型 FastDigest 缓冲液组成消除了星活性效应。

    特点

    •所有 FastDigest 酶在通用型缓冲液中的 100% 活性
    •与下游应用的 100% 缓冲液兼容性
    • 5–15 分钟内即可完成酶切
    •直接上样至凝胶
    •无星活性
    •可提供 176 种 FastDigest 酶

    应用

    •分子克隆
    •限制位点作图
    •基因分型
    •Southern 印迹
    •限制性片段长度多态性 (RFLP)
    • SNP 分析

    备注:FastDigest 绿色缓冲液在 DNA 酶切反应和下游应用中具有和无色 FastDigest 缓冲液一样的高性能。对于需要通过荧光激发进行产物分析的应用(例如在紫外光下测定浓度),则建议使用无色 FastDigest 缓冲液。

    规格

    甲基化敏感性
    对 CpG 甲基化敏感, 对 Dam 甲基化不敏感, 对 Dcm 甲基化不敏感
    Not I
    兼容缓冲液
    10X FastDigest 缓冲液/FastDigest Green 缓冲液
    对热失活敏感
    最佳反应温度
    37°C
    类型 IIS RE
    数量
    50 μL
    产品类型
    限制性内切酶
    研究类别
    传统方法克隆
    产品线
    FastDigest
    突出端
    5' protruding ends
    Inactivation Temperature
    80°C

    内容与储存

    • FastDigest NotI (50 μL)
    • 10X FastDigest Buffer (1.0 mL)
    • 10X FastDigest Green Buffer (1.0 mL)
    K16215 RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit, with DNase I
    K16225 RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit, with DNase I
    NA NA
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    EL0012 T4 DNA Ligase (5 U/µL)
    EL0011 T4 DNA Ligase (5 U/µL)
    EF0651 FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase (1 U/µL)
    EF0652 FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase (1 U/µL)
    EK0032 T4 Polynucleotide Kinase (10 U/µL)

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    常见问题解答 (常见问题)


    FastDigest限制性内切酶的单位或活性是多少?


    FastDigest酶的活性定义为在20µL FastDigest缓冲液中,1µL FastDigest酶在5至15分钟内切割1µg底物DNA。这与传统限制性内切酶的活性形成了对比,传统限制性酶的活性定义为1个单位的酶在50µL酶的最佳缓冲液中在60分钟内水解1µgλDNA。

    其定义为1个单位的酶在50µL酶的最佳缓冲液中在60分钟内水解1µgλDNA。

    我可以使用Thermo Scientific常规限制性酶和FastDigest限制性酶双重消化我的DNA吗?


    为了获得快速反应和100%缓冲液兼容性的最佳结果,我们强烈建议在双重消化中使用FastDigest限制性酶。然而,在某些情况下,可以使用Thermo Scientific常规酶和Fastdigest限制性酶的混合物进行双重消化。有关具体建议,请联系我们的技术服务,提供有关您计划使用的酶和DNA模板的详细信息。

    FastDigest缓冲液中Mg2+的浓度是多少?


    FastDigest缓冲区的组成是专有的。


    在我们的限制性内切酶克隆支持中心中查找其他提示、疑难解答帮助和资源。

    r后在琼脂糖凝胶电泳上观察到出乎意料的DNA条带
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