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- 2025年08月12日
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北京义翘神州科技股份有限公司
- 服务名称：
免疫印迹（WB）检测服务
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Western Blot检测服务
• 拥有先进的检测仪器，可以提供高通量的抗体检测服务；
• 具有丰富的检测经验, 每年进行10,000次以上抗体的Western Blot检测；
• 拥有庞大的产品库支持: 有100种以上细胞和组织裂解液，1,500多种WB应用的抗体，以及多种优质二抗供您选购。
WB检测服务内容
Western Blot检测案例展示
Western Blot实验仪器平台
WB检测服务流程
Western Blot检测相关内容
WB（Western Blot）是一种用于检测特定蛋白质在样本中的表达水平的实验技术。
蛋白质样品的准备：包括细胞或组织的裂解、蛋白质的提取和定量。
蛋白质的电泳分离：通常使用SDS-PAGE来根据蛋白质的分子量进行分离。
转移：将分离的蛋白质从凝胶转移到固相支持物上，如PVDF或硝酸纤维素膜。
膜的封闭：为了防止非特异性结合，需要使用封闭液（如脱脂奶粉或BSA溶液）封闭膜上未被蛋白占据的部分。
一抗的孵育：使用特异性的一抗与目标蛋白结合。
洗涤：去除未特异性结合的一抗。
二抗的孵育：使用标记有酶或荧光团的二抗与一抗结合。
洗涤：再次洗涤以去除未特异性结合的二抗。
检测：使用底物进行显色或荧光检测，酶标记的二抗常用底物如ECL（增强化学发光）。
条带的定量分析：通过成像系统捕获信号，并使用软件对条带的光密度进行定量分析。
内参照的选择：选择一个在不同样本中表达相对恒定的蛋白质作为内参照，用于数据的标准化。
实验设计：包括样本的收集、处理和分析，以及对照组和实验组的设置。
抗体的选择：选择高特异性和亲和力的抗体对目标蛋白进行检测至关重要。
膜的选择：根据实验需求选择合适的转移膜，不同的膜对蛋白质的结合能力不同。
转移效率的优化：通过调整电压、时间和其他条件来优化蛋白质的转移效率。
非特异性结合的控制：采取措施减少非特异性结合，如优化封闭液的组成和孵育条件。
数据的重复性和可重复性：确保实验结果的可靠性，进行多次重复实验。
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文献和实验最近师妹开始做 WB 实验了，但是一天又一天重复做，却次次结果不理想。除了没有拿到组会可以汇报的条带外，师妹集齐了所有奇奇怪怪的条带：微笑带，皱眉带，拖尾带，甚至没有条带…… 师妹也因此对我发出了灵魂拷问：「为什么 WB 实验这么容易翻车？」 虽然 WB 是一类基础实验，但是基础并不代表简单。翻车的主要原因在于 WB 的步骤实在繁琐：从配置蛋白胶开始，到蛋白电泳、蛋白转膜、抗体孵育，一整套流程下来花费 1～2 天的时间才能进行最后的显影。这些环节中但凡有一个出错，就会导致实验
「救命！做 WB 蛋白样品提取时，样品加入裂解液，离心后发现管里有很多的胶状物，非常粘稠，有点像鼻涕！多加裂解液稀释一下仍然没有效果，蛋白浓度还变得很低。不死心的我把它戳出来玩了一会，戳戳戳仍然是一大团，这粘稠物是什么？对我的后续实验会有什么影响？」 当你看到这团粘稠的「鼻涕」，就意味着你即将经历下面五个难题的考验： 1. 样品吸液困难 堵塞移液器：离心后吸上清液的时候胶状物会堵塞移液器头，移液后上清液所剩无几。 无法分离上清液：样品太
毛毛虫0118 我想用人血标本做WB，请问血标本最多可以放多久啊？还有做WB的话，要收集大概多少毫升血就可以了呢？ 毛毛虫0118 为什么没有人回复我啊？ volano 建议你还是自己摸索一个量 首先，不知道你要做的目的蛋白是什么？分子量有多大？是不是容易降解？ 如果分子量大，不容易降解，那可以储存比较长时间，如果你的目的蛋白是小蛋白那就是越新鲜越好吧，我看过师姐做的12KD
