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- 外泌体染色：PKH67/PKH26
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- 2026年04月12日
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- 提供商：
研载生物
- 服务名称：
外泌体染色：PKH67/PKH26
- 规格：
样
一、技术简介
Exosome（外泌体）是由活细胞分泌小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；参与细胞之间的交流，物质的运输以及正常生理过程的维持，此外还与疾病的产生有关。对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前对于外泌体的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料和膜渗透型的化合物等。
本司可以提供外泌体染色服务，包括亲脂性染料：PKH-67（green）/PKH-26（red），染料可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出荧光，主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞失踪研究。PKH67的体内荧光半衰期为10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更长的半衰期，标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。
二、实验流程
1. 外泌体BCA法定量。
2. 外泌体PKH67/PKH26染色。
3. 染好的外泌体纯化及浓缩（染好的外泌体可用于细胞实验、动物实验等）。
4. 提供实验报告。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：外泌体或由我司分离外泌体。
2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期：3个工作日。
备注：价格不包含染色费。 
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文献和实验[1]Yan Y, Wang P, Tang X, Wang Y, Xiao M, Liu Z, Tu X, Li X. Engineered Dll4-overexpressing osteocyte-derived exosomes enhanced bone regeneration by regulating osteogenesis and angiogenesis. Theranostics. 2026 Jan 1;16(6):2780-2797. doi: 10.7150/thno.121905. PMID: 41510168; PMCID: PMC12775673.
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主要分为两大类，第一类是 PKH67（绿色荧光）/PKH26（红色荧光），由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合，所以染色效果较好，应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料，包括DiI（橙色荧
PKH染料，如PKH67和PKH26，是高荧光、亲脂性的长链羰花青染料，目前被应用于细胞外囊泡（EVs）及其功能的研究，有研究评估了PKH在研究EV摄取时的适用性，发现PKH标记会显著影响外泌体细胞摄取结果的真实性，引入假阳性结果[1]。 不同纯化方法去除PKH 已有共识的是，PKH标记EV会引入PKH颗粒杂质，Lai等人[2]首先发现非EV的PKH阳性结构的存在，他们表明用仅PKH67对照组比PKH67染色的EV样品具有更大的荧光信号。在上篇文章中，我们论证
到大量纳米颗粒，可能是胶束和聚集体，颗粒分布在80-400 nm，与外泌体所在的粒径区间（30-150 nm）存在交集，这与之前报告的结果一致[2, 3]。PKH聚集而成的纳米颗粒自身的荧光干扰不容忽视，Lai 等人[4]研究表明用 PKH67 染色（没有 EV）甚至比 PKH67 染色的 EV 具有更强的荧光信号，这些同样具有荧光的纳米颗粒会“伪装”成外泌体，影响标记阳性率、外泌体粒径分布和细胞摄取结果。 Fig.1 NTA视频观察到大量聚集的PKH颗粒 2. 弥散造成的假阳
