Stbl2感受态细胞

       Stbl2感受态细胞
Stbl2 Chemically Competent Cell
产品编码：                           保存条件： -80℃  
产品规格:

Stbl2
pUC19（control vector）	10pg/μl        10μl

               
Stbl2感受态细胞基因型：
 F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ^-Δ(lac-proAB)  
Stbl2感受态细胞简要说明：
CMbio Stbl2菌株来源于 JM109 E. coli strain，适合克隆不稳定插入片段（正向重复序列，逆转录病毒序列等）；mcr A 突变和mcr BC-hsdRMS-mrr  deletion 使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列；同时Stbl2也可用于慢病毒载体的构建。recA1 和 endA1 的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。不存在lacI^qZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。
CMbio  Stbl2感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19检测转化效率可达10⁹ cfu/μg DNA。
 
Stbl2感受态细胞操作说明：

1. CMbio Stbl2感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入0.9 mL 室温 S.O.C. 培养基，使用其他培养基会降低转化效率。

4. 30℃，225 rpm复苏90分钟。
 （当质粒中含有不稳定片段时， 30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control PUC19 计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟。）

5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.培养基上。
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。  （若转化control PUC19 计算转化效率，则需37℃培养过夜）
Stbl2感受态细胞注意事项：

1.  感受态细胞最好在冰上融化。
2.  混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

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