F-BL21(DE3)感受态细胞

 

BL21感受态细胞

BL21 Chemically Competent Cell
产品编码：                          保存条件： -80℃  
产品规格:

BL21	20×100μl
pUC19（control vector）	10pg/μl            10μl

    
BL21感受态细胞基因型：
E. coli B F- dcm ompT hsdS(r_B- m_B-) gal [malB⁺]_K-12(λ^S)
BL21感受态细胞简要说明：
 BL21是最早开发的用于原核表达的菌株，BL21（DE3）、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达，不含T7 RNA聚合酶，所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如：pET系列)；但含有大肠杆菌RNA聚合酶，可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，pMAL质粒）。
 High5^TM系列 BL21感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达10⁷cfu/μg。
 
BL21感受态细胞操作说明：

1.  取100μl冰上融化的BL21感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激90秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
BL21感受态细胞注意事项：

1.   感受态细胞最好在冰上融化。
2.  混入质粒时应轻柔操作。
3.  转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.  诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2mM均可）。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

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