TOP10F´ 感受态细胞

TOP10F`感受态细胞

TOP10F` Chemically Competent Cell
产品规格:

TOP10F	10×100μl
pUC19（control vector）	10pg/μl    10μl

     
TOP10F`感受态细胞基因组:
F´{lacI<sup>q</sup> Tn10 (TetR)} mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1araD139 ∆(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
TOP10F`感受态细胞背景说明：
   CMbio TOP10F`菌株来源于TOP10菌株。将F`{lacIq Tn10 (TetR)}因子转入TOP10菌株，即为TOP10F`。该F`因子携带lacI^q 抑制子，可抑制trc，tac，lac等启动子下游基因的表达，从而可以用于一些表达毒性蛋白质粒的扩繁。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。CMbio TOP10F 可用于构建克隆，蓝白斑筛选（如用于蓝白斑筛选，需在培养基中加入IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达）实验，具有四环素抗性。CMbio High5^TM系列TOP10F`感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>10<sup>7</sup>cfu/μg。
TOP10F`感受态细胞操作使用：

1. CMbio TOP10F`感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激60秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应 抗生素的2YT或LB培养基上。
5.  将平板倒置放于37℃培养箱12-16h，时间过长会产生假阳性小菌落。

TOP10F`感受态细胞注意事项：

1.  CMbio 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时 间过长，长时间存放会降低转化效率。
2.  混入质粒或连接产物时应轻柔操作
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

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  上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。 
上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类，极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。